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一溪霜月

木虫 (正式写手)

[求助] 双酚A的HPLC分析 已有3人参与

第一次使用HPLC,分析的样品是 双酚A的水溶液。WATER1525的HPLC,C18的柱子,仪器有10微升的定量环流动相是甲醇和水1:1,
检测波长在280nm,浓度在10-6 g/L(-6是上标)。但是现在进样的时候发发现杂峰很多,而且进完BPA之后进了一针甲醇,发现
有在BPA出峰的位置出峰了,当然峰高比标品低了很多,反复进几次甲醇才能没有;再次进同样浓度的标品时峰面积和峰高都重复
不了。我想分析的混合溶液,双酚A只是其中的一种,单独进标品就是这个样子。。。。
请教各位使用HPLC的高手这可能是什么原因?  万分感谢!
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liwentao2010

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山涛

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
一溪霜月: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-10-23 20:35:36
楼主的样品浓度很低,达到ug/L,估计响应值也很低,HPLC测定时杂质干扰较为严重,建议楼主采用UPLC测试一下,看看
加油!
2楼2014-10-23 17:30:14
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liwentao2010

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山涛

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 一溪霜月 at 2014-10-23 17:41:17
我进第一针样品的时候峰面积大约是6万多一点吧,第二针就只有6千多了。。。完全重复不不了啊。 那是不是浓度在10-4g/L(-4是上标)就可以了呢?
实验室木有UPLC...

0.1mg/L浓度也很低,楼主可以用200ul进样环试试,不行的话,估计需要采用UPLC测试
加油!
5楼2014-10-24 10:33:15
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
一溪霜月: 金币+5 2014-10-25 10:12:43
会不会是之前的残留,定量环或者色谱柱上的残留
可以试试进完一针之后,清洗一下定量环,再进甲醇的空白,再进样品,看还会不会这样,如果还这样,彻底清洗一下色谱柱
人生若只如初见...
6楼2014-10-24 10:39:38
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一溪霜月

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-10-24 15:21:58
恩,订购一个,或者借一个型号匹配的,试一下看看,不一定能解决问题...

谢谢你的建议,问题已基本解决,浓度提高到了50mg/L,进样量15微升,基本差不多了,条件再优化下就可以了
10楼2014-10-25 10:12:25
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普通回帖

一溪霜月

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-10-23 17:30:14
楼主的样品浓度很低,达到ug/L,估计响应值也很低,HPLC测定时杂质干扰较为严重,建议楼主采用UPLC测试一下,看看

我进第一针样品的时候峰面积大约是6万多一点吧,第二针就只有6千多了。。。完全重复不不了啊。 那是不是浓度在10-4g/L(-4是上标)就可以了呢?
实验室木有UPLC
3楼2014-10-23 17:41:17
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
一溪霜月: 金币+5, 有帮助 2014-10-23 20:35:48
浓度太低了 可以参考一下:http://wenku.baidu.com/link?url= ... D90I1gj0H9ExrbjUTwK
其中浓度为(调整为10μl进样):(2.5 - 100)×10-3 g/L。
归零
4楼2014-10-23 20:04:30
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一溪霜月

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-10-24 10:33:15
0.1mg/L浓度也很低,楼主可以用200ul进样环试试,不行的话,估计需要采用UPLC测试...

木有200ul进样环.。。
只能增加进样量了。。。。。
7楼2014-10-24 15:19:23
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一溪霜月

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-10-24 10:39:38
会不会是之前的残留,定量环或者色谱柱上的残留
可以试试进完一针之后,清洗一下定量环,再进甲醇的空白,再进样品,看还会不会这样,如果还这样,彻底清洗一下色谱柱

你说的方面都做过,还是不行。。。。
8楼2014-10-24 15:20:03
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

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引用回帖:
7楼: Originally posted by 一溪霜月 at 2014-10-24 15:19:23
木有200ul进样环.。。
只能增加进样量了。。。。。...

恩,订购一个,或者借一个型号匹配的,试一下看看,不一定能解决问题

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加油!
9楼2014-10-24 15:21:58
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