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走走听听

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC上如何选择色谱柱分析低极性的物质 已有3人参与

有一个石油醚的提取物,要用HPLC分析一下成分复杂程度,选择了waters Atlantis T3柱,用90%的甲醇跑出来只有一个峰可是明明物质还不是纯的,所以想求助大家,我这种石油醚提取物应该用什么色谱柱和什么条件来分析?实在是对色谱柱这方面不了解啊。
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fagui168

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
走走听听: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-31 08:55:05
不知道楼主用的是什么检测器,石油醚部位的物质基本都是些极性很小的东西,而且往往没有紫外吸收或只有末端吸收,使用紫外检测器可能分析时大部分都不会出峰。用反相的话 我觉得可能不太适合,楼主有条件的话试试正相
改变你不能改变的,适应你不能适应的
2楼2014-03-29 13:49:13
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fagui168

银虫 (正式写手)

★ ★
费姚永芬: 金币+2, 周末愉快 2014-03-29 14:06:31
还有就是楼主如果是做天然产物的话,样品前处理不彻底,做石油醚部位的化合物很容易污染柱子,而且不容易冲洗。使用时注意了
改变你不能改变的,适应你不能适应的
3楼2014-03-29 13:53:06
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走走听听

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fagui168 at 2014-03-29 13:53:06
还有就是楼主如果是做天然产物的话,样品前处理不彻底,做石油醚部位的化合物很容易污染柱子,而且不容易冲洗。使用时注意了

就是紫外检测,上样前扫过全波长,在230nm处有吸收值,正相的话我该选择什么柱子啊?
4楼2014-03-29 14:50:43
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fagui168

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 走走听听 at 2014-03-29 14:50:43
就是紫外检测,上样前扫过全波长,在230nm处有吸收值,正相的话我该选择什么柱子啊?...

我知道你做样前肯定做过扫描,但是你要记得这样低极性的物质一般都是模板吸收的。所以在选取波长时要十分注意其与液相系统的匹配,避免液相条件本身存在的误差影响到你的物质分离效果。楼主这种情况个人觉得可以用DAD走一下样,看看三维图物质的分离情况以及其紫外吸收的情况。如果总体紫外吸收还算可以,那可以试试摸索适宜的液相条件,如果还是不理想,那就可能要考虑更换检测器,如ELSD。
改变你不能改变的,适应你不能适应的
5楼2014-03-29 16:25:01
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月亮弯弯

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
走走听听: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-31 08:54:57
正相,硅胶色谱柱,正己烷和异丙醇作流动相,检测看看
6楼2014-03-29 19:41:02
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.考虑紫外吸收波长
2.考虑色谱柱分离情况
3.优化分离方法
7楼2014-03-29 19:45:35
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xianpower

铁虫 (小有名气)

楼主,正相能做出来么?
8楼2014-03-31 15:31:11
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Ancker

铁杆木虫 (正式写手)

T3的柱子对极性强的保留更好一些,看看出锋时间是不是和流动相有影响
9楼2014-03-31 16:24:12
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