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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 测发酵种子的量
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半半911

新虫 (小有名气)

[求助] 测发酵种子的量 已有4人参与

看到很多文献表示发酵种子接种量，单位是W/V。按照我的理解是，将接种液离心过滤测菌丝干重，具体是怎么样呢？离心条件是多少，如何测干重。如果用滤纸过滤测干重，可能变化很小，因为菌丝含量本身很少。求各位的大神们给支支招。
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1楼 2014-10-23 11:00:13
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半半911

新虫 (小有名气)
不能沉啊
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2楼2014-10-23 16:03:35
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半半911

新虫 (小有名气)
up
3楼2014-10-24 13:57:42
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maolichang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主做的什么发酵？加的种子干粉？
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交流
4楼2014-10-24 15:39:22
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般是测OD600的，菌体的OD600与菌量有线性关系（去查看文献）
利用菌体的OD值来确定菌体质量就行，这个会有一些误差，但作为发酵影响不大
接种量可以用v/v表示，这样就方便多了。
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5楼2014-10-24 15:45:13
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半半911

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by maolichang at 2014-10-24 15:39:22
楼主做的什么发酵？加的种子干粉？

我做丝状真菌的发酵，用麦粒发酵。
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6楼2014-10-25 17:00:56
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半半911

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2014-10-24 15:45:13
一般是测OD600的，菌体的OD600与菌量有线性关系（去查看文献）
利用菌体的OD值来确定菌体质量就行，这个会有一些误差，但作为发酵影响不大
接种量可以用v/v表示，这样就方便多了。

是用接种体积表示方便，但感觉不太准确啊。OD值好像是跟细胞数量有关系的吧。像丝状真菌类，比较复杂的。用OD600测不准确，我之前试过。
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7楼2014-10-25 17:02:37
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愤怒的家雀

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

离心测体积，既然ＯＤ６００不可以只能这样了，过滤感觉差异会大一点，离心测一下体积，有专门测离心菌体体积的离心管，具体转速有待进一步考证！或是做平板也可以测出菌体量，不过麻烦一点，但准确率更高，都是活菌！
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8楼2014-10-27 12:11:28
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

丝状菌确实不能用OD600的方法。离心条件自己看着办就行了，能让细胞沉淀完全就可以了。要不你试试看发酵液pH值跟菌体量有没有对应关系。
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9楼2014-10-27 12:19:14
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半半911

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2014-10-27 12:19:14
丝状菌确实不能用OD600的方法。离心条件自己看着办就行了，能让细胞沉淀完全就可以了。要不你试试看发酵液pH值跟菌体量有没有对应关系。

我的初衷只是想保证每次用于固体发酵的接种液的菌丝质量一样，希望有一种方法来衡量。打算离心，将沉淀物烘干。
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10楼2014-10-27 19:03:09
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