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周志惠

新虫 (小有名气)

[求助] 第一次提RNA，请大家帮忙看看这是哪里出现问题了呢 已有2人参与

第一次提细菌的RNA，请大家帮忙看看这是哪里出现问题了

第一次提RNA，请大家帮忙看看这是哪里出现问题了呢
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1楼 2014-10-21 16:18:33
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-10-22 19:54:48
三条电泳各代表啥？中间一个看起来还可以，但是上样孔有残留，应该是蛋白去除不完全，可能是RNA提取过程中RNA有降解……提取的时候枪头、EP管最好都灭菌或DEPC处理，动作尽量轻柔……
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2014-10-21 17:39:03
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周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangranjun at 2014-10-21 17:39:03
三条电泳各代表啥？中间一个看起来还可以，但是上样孔有残留，应该是蛋白去除不完全，可能是RNA提取过程中RNA有降解……提取的时候枪头、EP管最好都灭菌或DEPC处理，动作尽量轻柔……

最左边是Marker,HindIII的Marker,为啥最右边的是这样的呢，提到最后的那个沉淀是很明显的白色的，还是应该看不出来的沉淀呢
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3楼2014-10-21 20:21:56
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by 周志惠 at 2014-10-21 20:21:56
最左边是Marker,HindIII的Marker,为啥最右边的是这样的呢，提到最后的那个沉淀是很明显的白色的，还是应该看不出来的沉淀呢...

RNA量多的话最后可能会有一些白色的残留
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
4楼2014-10-21 20:45:41
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就会提核酸

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-10-22 19:54:39
1：异丙醇沉淀的 RNA 多为半透明状。如果出现了白色沉淀，更可能是多糖残留。可以对分层后的上清再次氯仿抽提，或者降低样品起始量，来降低多糖污染。
2：哪个奇怪的孔，是上样量过多导致。使用 1/3 试一试。
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5楼2014-10-21 22:36:07
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