24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 4367  |  回复: 5

cnzpli

金虫 (正式写手)

[求助] 原核表达提蛋白细菌裂解液为什么要冰上消化? 已有2人参与

如题,在做原核表达。裂解细菌选择了含1mg/ml溶菌酶的裂解液。溶菌酶最适温度应该是37度左右,但是为什么资料上都是冰上裂解,然后超声处理呢?
我试了直接37度裂解之后不超声波处理直接离心制样感觉也还可以啊
求大神指导!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl25413477

木虫 (正式写手)

欧巴

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是个人习惯问题吧,在冰上操作是怕蛋白质降解;但是我个人是同意楼主的做法的!
路漫漫兮,吾必上下而求索!
2楼2014-10-13 13:56:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl25413477

木虫 (正式写手)

欧巴

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by cjl25413477 at 2014-10-13 13:56:35
是个人习惯问题吧,在冰上操作是怕蛋白质降解;但是我个人是同意楼主的做法的!

补充下冰上操作是为了大量的获得目的蛋白,如果只是用来蛋白检测按照楼主的做法,没有问题!不过建议需要统一操作,还是在冰上操作,得到的数据更有说服力!
路漫漫兮,吾必上下而求索!
3楼2014-10-13 14:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl25413477

木虫 (正式写手)

欧巴

引用回帖:
2楼: Originally posted by cjl25413477 at 2014-10-13 13:56:35
是个人习惯问题吧,在冰上操作是怕蛋白质降解;但是我个人是同意楼主的做法的!

补充说明下,如果需要大量的目的蛋白的话,还是要在冰上操作的,如果只是用来检测,楼主的方法可以!
路漫漫兮,吾必上下而求索!
4楼2014-10-13 14:07:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cnzpli: 金币+10, ★★★很有帮助, 很全面很详细 2014-10-13 16:05:50
包涵体变性、复性及纯化
http://blog.sina.com.cn/s/blog_5f4f3e2d0100t8bb.html
5楼2014-10-13 14:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnzpli

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cjl25413477 at 2014-10-13 14:07:33
补充说明下,如果需要大量的目的蛋白的话,还是要在冰上操作的,如果只是用来检测,楼主的方法可以!...

好吧 看来还是得用超声波
突然想到pmsf高于4度容易失活的 哈哈
6楼2014-10-13 15:57:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cnzpli 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂求收留 +30 果然有我 2026-04-10 31/1550 2026-04-13 14:18 by 张zhihao
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +3 河南农业大学-能 2026-04-12 3/150 2026-04-13 12:44 by 木鱼.
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 085500求调剂材料 +10 易11122 2026-04-09 10/500 2026-04-11 10:39 by maddjdld
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 化学工程与技术324调剂 +23 孙常华 2026-04-09 25/1250 2026-04-11 00:07 by 骑牛渡寒江
[考研] 一志愿211,化学310分,本科重点双非,求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH(等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 085404,334分,求调剂 +5 sunjie8888 2026-04-08 8/400 2026-04-09 07:26 by sunjie8888
信息提示
请填处理意见