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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » TRIZOL提RNA 壳聚糖
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AIfever

木虫 (正式写手)

[求助] TRIZOL提RNA 壳聚糖 已有1人参与

请问用TRIZOL提取RNA时，壳聚糖会对最后RNA纯度有影响吗？我每次260/280只有1.55左右
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1楼 2014-10-06 10:18:04
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就会提核酸

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-06 12:37:14
AIfever: 金币+2, ★有帮助, 好吧，我找到文献确定壳聚糖对RNA提取有影响了，普通的trizol不适用，谢谢了 2014-10-07 10:47:00
不知道壳聚糖是否影响 260/280 比值，但我的看法是，你洗涤力度不够，没有彻底去除苯酚。如果 RNA 沉淀比较大，建议洗涤时至少要静置 5 分钟，并频繁混匀，使沉淀中残留的苯酚能渗透出来。
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2楼2014-10-06 11:14:51
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AIfever

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 就会提核酸 at 2014-10-06 11:14:51
不知道壳聚糖是否影响 260/280 比值，但我的看法是，你洗涤力度不够，没有彻底去除苯酚。如果 RNA 沉淀比较大，建议洗涤时至少要静置 5 分钟，并频繁混匀，使沉淀中残留的苯酚能渗透出来。

你是指乙醇洗涤的时候吗，可是我的RNA量很少，沉淀肉眼根本看不到
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3楼2014-10-07 10:18:13
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354929697

铜虫 (初入文坛)
同志呀  我也是做壳聚糖，真菌RNA的。现在快愁死我了。每次都是质量不过关~~  你有什么经验吗？
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4楼2014-10-13 09:25:33
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AIfever

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 354929697 at 2014-10-13 09:25:33
同志呀  我也是做壳聚糖，真菌RNA的。现在快愁死我了。每次都是质量不过关~~  你有什么经验吗？

真菌我没做过，我现在想试一下改良的CTAB法，和植物RNA提取试剂盒，可是老板太抠
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5楼2014-10-13 09:52:49
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354929697

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by AIfever at 2014-10-13 09:52:49
真菌我没做过，我现在想试一下改良的CTAB法，和植物RNA提取试剂盒，可是老板太抠...

试剂盒还是挺方便的~~我们老师也是  不太舍得花钱。
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6楼2014-10-13 11:22:20
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AIfever

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 354929697 at 2014-10-13 11:22:20
试剂盒还是挺方便的~~我们老师也是  不太舍得花钱。...

那你可以试试CTAB法，应该也行
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7楼2014-10-13 11:36:21
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AIfever

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 354929697 at 2014-10-13 09:25:33
同志呀  我也是做壳聚糖，真菌RNA的。现在快愁死我了。每次都是质量不过关~~  你有什么经验吗？

你好，请问你现在RNA提出来了吗
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8楼2014-12-10 22:28:40
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赶庙会啊

新虫 (初入文坛)
你好，请问那篇文献写到壳聚糖对提取RNA有影响，应该用什么方法提取RNA？
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9楼2016-03-18 18:28:09
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AIfever

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 赶庙会啊 at 2016-03-18 18:28:09
你好，请问那篇文献写到壳聚糖对提取RNA有影响，应该用什么方法提取RNA？

壳聚糖在酸性条件下会吸附RNA，降低得率。试试CTAB法
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10楼2016-03-19 08:55:05
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