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muguawl

金虫 (小有名气)

[求助] Trizol 大量抽提RNA时，该加氯仿时加成无水乙醇，还有救吗？

Trizol 大量抽提RNA时，该加氯仿时加成无水乙醇，还有救吗？

求各位大虾指点？？？
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1楼 2013-07-29 19:03:31
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叶心飞翔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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muguawl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-30 10:11:07
重新提吧，就算挽救一点也解决不了问题
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2楼2013-07-29 19:22:29
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

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没事儿，你先昨晚试试吧！其实，加无水乙醇有除多糖的作用

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-07-30 00:45:24
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taojun

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-30 10:11:27
影响是会有的啊，你用无水乙醇相当于洗RNA了，理论上影响不会太大，你还是重新提取吧
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4楼2013-07-30 00:56:00
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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muguawl(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-30 10:11:33
你只有将其沉淀，然后加氯仿重新抽提，然后再次沉淀，洗涤！Good luck！
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互助互励，共奋共进！！
5楼2013-07-30 01:29:14
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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muguawl(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-30 10:11:41
氯仿主要是除蛋白，无水乙醇主要洗RNA，但是还有沉淀RNA的作用。你如果还想试试，可以DEPC水溶，然后再从氯仿这步开始，但是还是从新做比较靠谱。
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6楼2013-07-30 08:47:21
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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muguawl(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-30 10:11:48
RNA大量沉淀的乙醇浓度比DNA稍微低一点，可以通过添加DEPC处理ddH2O稀释乙醇浓度，避免RNA沉淀。
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为什么
7楼2013-07-30 08:50:50
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547star

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 547star at 2013-07-30 08:50:50
RNA大量沉淀的乙醇浓度比DNA稍微低一点，可以通过添加DEPC处理ddH2O稀释乙醇浓度，避免RNA沉淀。

我说错了，沉淀RNA的乙醇浓度要高一些。氯仿一般最多加等体积，DNA和RNA这时沉淀下来的量还比较少。
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为什么
8楼2013-07-30 13:31:24
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