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muguawl

金虫 (小有名气)

[求助] Trizol 大量抽提RNA时,该加氯仿时加成无水乙醇,还有救吗?

Trizol 大量抽提RNA时,该加氯仿时加成无水乙醇,还有救吗?

求各位大虾指点???
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叶心飞翔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
muguawl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-30 10:11:07
重新提吧,就算挽救一点也解决不了问题
2楼2013-07-29 19:22:29
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没事儿,你先昨晚试试吧!其实,加无水乙醇有除多糖的作用

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-07-30 00:45:24
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taojun

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-30 10:11:27
影响是会有的啊,你用无水乙醇相当于洗RNA了,理论上影响不会太大,你还是重新提取吧
4楼2013-07-30 00:56:00
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
muguawl(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-30 10:11:33
你只有将其沉淀,然后加氯仿重新抽提,然后再次沉淀,洗涤!Good luck!
互助互励,共奋共进!!
5楼2013-07-30 01:29:14
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
muguawl(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-30 10:11:41
氯仿主要是除蛋白,无水乙醇主要洗RNA,但是还有沉淀RNA的作用。你如果还想试试,可以DEPC水溶,然后再从氯仿这步开始,但是还是从新做比较靠谱。
6楼2013-07-30 08:47:21
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
muguawl(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-30 10:11:48
RNA大量沉淀的乙醇浓度比DNA稍微低一点,可以通过添加DEPC处理ddH2O稀释乙醇浓度,避免RNA沉淀。
为什么
7楼2013-07-30 08:50:50
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547star

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 547star at 2013-07-30 08:50:50
RNA大量沉淀的乙醇浓度比DNA稍微低一点,可以通过添加DEPC处理ddH2O稀释乙醇浓度,避免RNA沉淀。

我说错了,沉淀RNA的乙醇浓度要高一些。氯仿一般最多加等体积,DNA和RNA这时沉淀下来的量还比较少。
为什么
8楼2013-07-30 13:31:24
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