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AIfever

木虫 (正式写手)

[求助] TRIZOL提RNA 壳聚糖 已有1人参与

请问用TRIZOL提取RNA时,壳聚糖会对最后RNA纯度有影响吗?我每次260/280只有1.55左右
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就会提核酸

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-10-06 12:37:14
AIfever: 金币+2, 有帮助, 好吧,我找到文献确定壳聚糖对RNA提取有影响了,普通的trizol不适用,谢谢了 2014-10-07 10:47:00
不知道壳聚糖是否影响 260/280 比值,但我的看法是,你洗涤力度不够,没有彻底去除苯酚。如果 RNA 沉淀比较大,建议洗涤时至少要静置 5 分钟,并频繁混匀,使沉淀中残留的苯酚能渗透出来。
2楼2014-10-06 11:14:51
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AIfever

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 就会提核酸 at 2014-10-06 11:14:51
不知道壳聚糖是否影响 260/280 比值,但我的看法是,你洗涤力度不够,没有彻底去除苯酚。如果 RNA 沉淀比较大,建议洗涤时至少要静置 5 分钟,并频繁混匀,使沉淀中残留的苯酚能渗透出来。

你是指乙醇洗涤的时候吗,可是我的RNA量很少,沉淀肉眼根本看不到
3楼2014-10-07 10:18:13
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354929697

铜虫 (初入文坛)

同志呀  我也是做壳聚糖,真菌RNA的。现在快愁死我了。每次都是质量不过关~~  你有什么经验吗?
4楼2014-10-13 09:25:33
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AIfever

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 354929697 at 2014-10-13 09:25:33
同志呀  我也是做壳聚糖,真菌RNA的。现在快愁死我了。每次都是质量不过关~~  你有什么经验吗?

真菌我没做过,我现在想试一下改良的CTAB法,和植物RNA提取试剂盒,可是老板太抠
5楼2014-10-13 09:52:49
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354929697

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by AIfever at 2014-10-13 09:52:49
真菌我没做过,我现在想试一下改良的CTAB法,和植物RNA提取试剂盒,可是老板太抠...

试剂盒还是挺方便的~~我们老师也是  不太舍得花钱。
6楼2014-10-13 11:22:20
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AIfever

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 354929697 at 2014-10-13 11:22:20
试剂盒还是挺方便的~~我们老师也是  不太舍得花钱。...

那你可以试试CTAB法,应该也行
7楼2014-10-13 11:36:21
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AIfever

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 354929697 at 2014-10-13 09:25:33
同志呀  我也是做壳聚糖,真菌RNA的。现在快愁死我了。每次都是质量不过关~~  你有什么经验吗?

你好,请问你现在RNA提出来了吗
8楼2014-12-10 22:28:40
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赶庙会啊

新虫 (初入文坛)

你好,请问那篇文献写到壳聚糖对提取RNA有影响,应该用什么方法提取RNA?
9楼2016-03-18 18:28:09
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AIfever

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 赶庙会啊 at 2016-03-18 18:28:09
你好,请问那篇文献写到壳聚糖对提取RNA有影响,应该用什么方法提取RNA?

壳聚糖在酸性条件下会吸附RNA,降低得率。试试CTAB法
10楼2016-03-19 08:55:05
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