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wade123456

木虫 (知名作家)

快乐的小蜜蜂

[求助] 菌液PCR有拖带,什么情况,求大神分析。。。 已有1人参与

如标题,详情见图。。。自己设计的引物,非通用引物。不知道是不是阳性啊。。。

菌液PCR有拖带,什么情况,求大神分析。。。
菌液 PCRA1-H2 2014-09-24 20hr 12min.jpg
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陪伴是最长情的表白……
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wei521903

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wade123456: 金币+5, 有帮助, 第一位回复的 2014-09-25 09:39:11
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-25 12:43:58
菌P的确不好扩。一般都要设置正对照(确保可以扩出来的基因、引物)及负对照,通过正负对照来确定你反应buffer、酶等是否正常。你这个图上没有阳性的,拖带是引物二聚体。再试试吧。
2楼2014-09-24 21:10:34
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wade123456

木虫 (知名作家)

快乐的小蜜蜂

引用回帖:
2楼: Originally posted by wei521903 at 2014-09-24 21:10:34
菌P的确不好扩。一般都要设置正对照(确保可以扩出来的基因、引物)及负对照,通过正负对照来确定你反应buffer、酶等是否正常。你这个图上没有阳性的,拖带是引物二聚体。再试试吧。

谢谢了。。。
陪伴是最长情的表白……
3楼2014-09-25 09:39:07
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-25 12:44:17
对照marker的位置,拖尾的不是引物二聚体,是非特异扩增。你需要先排除非特异扩增是反应体系、引物设计引起的还是mix中taq酶活性变化引起的。
4楼2014-09-25 11:29:03
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