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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌液PCR有拖带，什么情况，求大神分析。。。
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wade123456

木虫 (知名作家)

快乐的小蜜蜂

[求助] 菌液PCR有拖带，什么情况，求大神分析。。。 已有1人参与

如标题，详情见图。。。自己设计的引物，非通用引物。不知道是不是阳性啊。。。

菌液PCR有拖带，什么情况，求大神分析。。。
菌液 PCRA1-H2 2014-09-24 20hr 12min.jpg
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陪伴是最长情的表白……
1楼 2014-09-24 20:36:57
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wei521903

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wade123456: 金币+5, ★有帮助, 第一位回复的 2014-09-25 09:39:11
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-25 12:43:58
菌P的确不好扩。一般都要设置正对照（确保可以扩出来的基因、引物）及负对照，通过正负对照来确定你反应buffer、酶等是否正常。你这个图上没有阳性的，拖带是引物二聚体。再试试吧。
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2楼2014-09-24 21:10:34
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wade123456

木虫 (知名作家)

快乐的小蜜蜂
引用回帖:
2楼: Originally posted by wei521903 at 2014-09-24 21:10:34
菌P的确不好扩。一般都要设置正对照（确保可以扩出来的基因、引物）及负对照，通过正负对照来确定你反应buffer、酶等是否正常。你这个图上没有阳性的，拖带是引物二聚体。再试试吧。

谢谢了。。。
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陪伴是最长情的表白……
3楼2014-09-25 09:39:07
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-25 12:44:17
对照marker的位置，拖尾的不是引物二聚体，是非特异扩增。你需要先排除非特异扩增是反应体系、引物设计引起的还是mix中taq酶活性变化引起的。
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4楼2014-09-25 11:29:03
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