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我听五月天木虫 (正式写手)
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[求助]
细胞最近总是染菌，帮忙分析一下什么原因？
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最近染菌的情况都一样，培基不变臭，只变黄。高倍数下，细胞焦平面能看到小白线高速转动、游动，培基很浑浊的时候小白线是抱团的。 最近的变量 1、干粉配置的培基换成了塑料瓶现成培基，烧瓶口不敢很猛了。 2、以前给药后，96孔板都一般都正常，最近有时有几个孔染菌，有时候整个板子染菌。 3、每次染菌都是一瓶培基用过几次之后，快用完时最明显。刚加好血清用几次都没出现问题。 4、貌似一年多没给超净台换高效滤膜了。 5、复苏细胞第一天好的，换液后，第二天就染菌。 怀疑 1、培基质量问题。cyagen的液体培养基。----估计培基有问题可能不大 2、操作问题。但是绝对没有手在瓶口上经过的类似低级错误。 3、超净台需要换膜？ 4、细胞室太脏需要熏蒸？ |
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【答案】应助回帖
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我听五月天: 金币+7, ★★★很有帮助 2014-09-18 07:37:14
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我听五月天: 金币+7, ★★★很有帮助 2014-09-18 07:37:14
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1、干粉配置的培基换成了塑料瓶现成培基，烧瓶口不敢很猛了。 我觉得细胞房每个星期要清洗, 做实验要干净利落,但是还是不要用酒精灯烧了. 首先温度就不是很够,然后时间也完全不够. 只是增加污染的机会而已. 2、以前给药后，96孔板都一般都正常，最近有时有几个孔染菌，有时候整个板子染菌。 没染菌的孔有什么规律么? 3、每次染菌都是一瓶培基用过几次之后，快用完时最明显。刚加好血清用几次都没出现问题。 怀疑是操作带来的污染. 水浴, 超净台, 吸管. 4、貌似一年多没给超净台换高效滤膜了。 这个有可能. 5、复苏细胞第一天好的，换液后，第二天就染菌。 这个不说明什么, 第一天要是有细菌可能也还没长起来. 建议楼主找找附近实验室的人看看楼主的设施和看楼主做一遍细胞,看看是哪里出了问题. |
4楼2014-09-18 02:56:38
风信子寻梦
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3楼2014-09-17 21:50:46
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