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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞污染了，请大家帮忙鉴定下是什么污染，如何处理
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ldf3129554

木虫 (著名写手)

[求助] 细胞污染了，请大家帮忙鉴定下是什么污染，如何处理 已有1人参与

这些天细胞出现莫名的污染现象，具体情况是，细胞培养液清澈，镜下观察发现有一团一团的莫名团块状物体，在RAW264.7细胞中贴壁生长，团块周围细胞不生长，在Hela细胞中成悬浮状，大面积漂浮，细胞生长状态极差，在293A细胞中成大面积漂浮的团块状。
细胞污染了，请大家帮忙鉴定下是什么污染，如何处理
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细胞污染了，请大家帮忙鉴定下是什么污染，如何处理-1
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细胞污染了，请大家帮忙鉴定下是什么污染，如何处理-2
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细胞污染了，请大家帮忙鉴定下是什么污染，如何处理-3
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知足常乐
1楼 2013-06-24 10:46:39
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刘丽佳_佳

新虫 (小有名气)
我的也有一点这种一团一团的，但数量很少，可以看到它可以接触到细胞，但稍用力摇又会飘走，不知lz和我情况一样么
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2楼2013-07-04 15:45:06
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refreshing11

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-04 17:02:03
以我养细胞四年多的经验来看，是真菌污染，这种情况下细胞是万万不能留了。你在细胞传代过程中一定要注意细节，操作台擦拭干净消毒好。这样书可以避免再污染的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-07-04 16:01:48
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

像葡萄球菌污染，真菌是小块的，散在的，有出芽的现象。我看是细胞不能要了
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加油
4楼2013-07-05 10:15:47
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ifyousee

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hela细胞都是很廉价的细胞系了，把细胞培养所用的培养液、PBS（D-hanks）、胰酶等等都换掉吧。
建议细胞培养环境、细胞培养箱、培养用具都彻底清洗消毒一下
细胞污染也是时有发生的，培养液里面如果有双抗就不太可能是细菌污染，细菌污染也很难会在倒置镜下看出什么门道，真菌污染的话40倍物镜下能看到一粒粒的真菌细胞，有些真菌呈链状、哑铃状，等等。你这个一坨一坨的有可能是细胞脱落的团块，也有可能是真菌。具体的不敢说一定是哪一种。
养细胞的话绝对无菌是不可能的，无论如何只能让微生物处于较低水平，发表在Cell、Nature上的文章养细胞也不以加抗生素为耻的
觉得细胞很重要可以加两性霉素B处理一下，不重要的话直接重新复苏或是重新要新的细胞系就可以了
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5楼2013-07-05 10:29:53
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司徒皮皮虾

金虫 (初入文坛)

研究僧

【答案】应助回帖

这个应该是真菌污染，一旦污染了之后就会一夜暴涨，影响细胞的正常生长，应尽快丢掉污染的培养瓶，然后做排查实验，如果是大面积污染的话很有可能是细胞培养液和移液枪有污染。移液枪的枪体里面是紫外照射不到的，所以要注意移液枪是否污染过。
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6楼2013-10-08 13:17:26
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astrozheng

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可能是霉菌污染。
以前养HEL细胞的时候，常常看见。用PBS洗洗好像好点，但是后来继续有。
再到后来看到装培养基的瓶子里面大团的霉菌，之前没有看到。
建议换新的培养基和PBS试试，可能会传几代后慢慢好点。
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个人签名用英文会没有空格，真是个bug.
7楼2014-04-18 23:51:01
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