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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 平板计数问题
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柒缘劫

铜虫 (初入文坛)

[求助] 平板计数问题 已有5人参与

新人菜鸟求助啊！！！最近在做芽孢菌固体发酵，然后取出1g倒入装有玻璃珠的100ml无菌水中静止20分钟后摇床30分钟然后倒入9ml无菌水试管中，依次做稀释倍数10-2到10-9，然后取三个水平涂布平板，每个水平涂两个平板各涂100ul，接着倒置37度培养箱培养18h后数菌数，接着问题出来了，稀释倍数低的比稀释倍数高的菌数还多这是怎么回事啊，我都重复做了很多遍了无论是枯草、地衣还是多粘问题依旧存在，我都崩溃了

平板计数问题
枯草02.jpg


平板计数问题-1
枯草12.jpg


平板计数问题-2
枯草14.jpg


平板计数问题-3
枯草27.jpg
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1楼 2014-09-08 09:36:01
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuxiaohui0908

禁言 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
柒缘劫: 金币+20, ★有帮助 2014-09-09 19:07:19
本帖内容被屏蔽
4楼2014-09-09 08:27:26
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普通回帖

xieyueoo

新虫 (小有名气)
涂的真好

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-09-08 23:00:18
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柒缘劫

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xieyueoo at 2014-09-08 23:00:18
涂的真好

额(⊙o⊙)…

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-09-09 06:57:46
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minxinlife

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
孩子都超过三百菌落了肯定不行，把接种稀释度在稀释两级

[ 发自小木虫客户端 ]
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读博是不是一定要211？Sci？都没有就滚去工作吗？
5楼2014-09-09 08:32:25
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RuyangHan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
柒缘劫: 金币+5 2014-09-09 19:07:55
你做10倍系列稀释的时候用什么来吸取菌液的？ 每个稀释度转接都是换新的吸管吗？ 假如没有，上一次稀释度的菌有可能更多地带到下一个稀释度。涂平板的三角棒每个稀释度都换新的吗？ 还有你做稀释的无菌水和培养基和平板都是灭过菌的吗？
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6楼2014-09-09 08:34:59
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柒缘劫

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuxiaohui0908 at 2014-09-09 08:27:26
固体发酵 你用的培养基是什么？你可以考虑一下打碎后再入无菌水稀释，再计数。如果打不碎，用无菌水稀释过程中，你可能会取到培养基的碎片，碎片上面可能会粘附一些菌，在低倍数你没有取到，但是高倍数你取到了，可 ...

固体发酵用的是米糠粕，那个在放入100ml带玻璃珠的无菌水中的三角瓶在摇床上应该就能打碎吧，还有由于是做寻找最佳培养基我有28个固体发酵的三角瓶，一个三角瓶至少涂6个平板，所以倾注法行不通啊
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7楼2014-09-09 18:59:40
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柒缘劫

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by RuyangHan at 2014-09-09 08:34:59
你做10倍系列稀释的时候用什么来吸取菌液的？ 每个稀释度转接都是换新的吸管吗？ 假如没有，上一次稀释度的菌有可能更多地带到下一个稀释度。涂平板的三角棒每个稀释度都换新的吗？ 还有你做稀释的无菌水和培养基和 ...

都是用移液枪啊，每个稀释度我都换枪头，涂布的三角棒我都有用酒精灯再次烧过，那些必须都有灭过菌啊！
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8楼2014-09-09 19:04:40
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liuxiaohui0908

禁言 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2014-09-10 07:56:22
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骆云飞

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这涂布的浓度还是有点高吧？再稀释几个梯度吧
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10楼2014-09-10 10:37:02
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