| 查看: 2719 | 回复: 11 | ||
[求助]
绿脓杆菌平板计数问题 已有1人参与
|
1.我做的绿脓杆菌（好氧菌、兼性厌氧菌）倾注培养，稀释度做到-8、-9、-10、-11，只记录有明显特征的菌落发现菌落梯度不是很明显，几个梯度做的计数差不多，并且均大于30且不超过300，平板表面有很多可见的大菌落，但是有很多的小点生长培养基内部（附图如下），不确定是否是绿脓杆菌，如果记录，-8、-9、-10三个稀释度的菌落就会超过300，但是由于小点过小，计数十分困难，且培养多久均不能生长成容易计数的菌落。因此我做了小验证试验：将仅有小点的菌落切下一块放入LB培养基中摇瓶培养发现菌液变绿（绿脓杆菌液体摇瓶特征），菌液 革兰氏染色也为阴性菌，且显微镜下显示绿脓杆菌特征。2.请问除了增大稀释度还能如何处理这种情况，上述方法是否能证明小点是绿脓杆菌？计数时是否需要记录这些小点？是否有人做倾注时在其他菌上也有类似情况？  20130904_153323.jpg  20130904_153818.jpg  20130904_153829.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
职称评审没过，求安慰
已经有34人回复
-
垃圾破二本职称评审标准
已经有17人回复
-
回收溶剂求助
已经有6人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
-
申请26博士
已经有5人回复
-
EST投稿状态问题
已经有7人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有4人回复
-
聘U V热熔胶研究人员
已经有10人回复
-
求助文献
已经有3人回复
-
投稿返修后收到这样的回复，还有希望吗
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 菌落计数的时候，大家都自己数平板上的菌落么？
已经有24人回复
- MPN法和平板计数法那个靠谱
已经有8人回复
- 绿脓杆菌在培养过程中培养基出现红褐色是什么原因？
已经有4人回复
- 关于稀释平板计数法的疑问
已经有16人回复
- 关于平板计数法，没有细菌生长是什么原因
已经有21人回复
- 新人求助 OD标准曲线绘制问题
已经有10人回复
- 关于金黄色葡萄球菌平板菌落计数问题
已经有22人回复
- 平板涂布计数的疑问
已经有9人回复
- 金黄色葡萄球菌计数
已经有6人回复
- 用MRS培养基倒平板进行乳酸菌计数，直接将菌液涂在平板表面可以吗？
已经有26人回复
- klebsiella pneumoniae和Klebsiella pneumonia是一种微生物吗
已经有4人回复
- 求助：细菌浓度的测量
已经有27人回复
- 菌落平板计数 菌落数差别大
已经有18人回复
- 芽孢杆菌OD值与活菌数相对应的标准曲线
已经有9人回复
- 土壤放线菌平板分离菌落计数的时候很微小的透明菌落要不要计？
已经有7人回复
- 平板计数法测定肠道菌群
已经有15人回复
- 【求助/交流】摇瓶有沉淀 如何测OD值？
已经有8人回复
- 【求助/交流】抑菌试验
已经有5人回复
- 【求助/交流】菌浓测定
已经有4人回复
- 【求助/交流】微生物培养过程中的OD值
已经有8人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌在营养琼脂上培养生长的平板计数问题
已经有19人回复
- 【求助/交流】请教细菌菌落平板计数法结果不太理解
已经有17人回复
- 【求助/交流】CFU怎么测定？
已经有18人回复
2楼2013-09-06 16:32:00
anyaxiong
铁杆木虫 (知名作家)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 8751.8
- 散金: 2291
- 红花: 26
- 沙发: 63
- 帖子: 8730
- 在线: 743.1小时
- 虫号: 974100
- 注册: 2010-03-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2013-09-06 20:56:07
4楼2013-09-07 15:41:20
5楼2013-09-07 15:44:01
mizhoulong
木虫 (著名写手)
环境卫生、微生物学
- MicEPI: 2
- 应助: 211 (大学生)
- 金币: 2980.3
- 散金: 30
- 红花: 13
- 帖子: 1853
- 在线: 194.3小时
- 虫号: 612016
- 注册: 2008-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境卫生
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
食品虫虫: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-09-16 14:45:25
感谢参与，应助指数 +1
食品虫虫: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-09-16 14:45:25
|
1.首先确定你的菌是不是纯菌——划线接种分单菌落，鉴定单菌落； 2.其次确定你的培养基有无污染——将空白平板倒置于温箱中培养72小时； 3.再次确定你的培养过程有无污染——实验的每一个步骤都设置空白对照； 4.最后确定你的原始样品中有无细小颗粒——食品、化妆品中常见。 —————————————————————————————————————— 以上都确定无误后，将纯菌在富营养培养基上（TSA常用）传代两次，将新鲜培养的细菌斜面洗下来（总量一般为10E9 CFU~10E11CFU,系列稀释到10E-10，接种10E-7~10E-9，一般可测出原始菌液浓度。 培养48h以后，因为使用倾注法，在琼脂内部的菌落生长不良，一般呈细小的点，表面的因为接触空气，能长得饱满。 希望能有用。 |
6楼2013-09-09 09:07:53
mizhoulong
木虫 (著名写手)
环境卫生、微生物学
- MicEPI: 2
- 应助: 211 (大学生)
- 金币: 2980.3
- 散金: 30
- 红花: 13
- 帖子: 1853
- 在线: 194.3小时
- 虫号: 612016
- 注册: 2008-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境卫生
7楼2013-09-09 09:08:43
8楼2014-01-08 11:13:24
9楼2014-01-08 13:37:20
10楼2014-01-17 15:53:35