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明媚角落15

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC流动相的盐溶液有什么作用 已有2人参与

请教各位虫友,在HPLC中,流动相的盐溶液有什么作用呢?我原本的流动相是乙酸铵溶液和乙腈梯度洗脱,但是把乙酸铵换成水梯度不变,没有出现主峰啊,这是为什么呢?
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
明媚角落15: 金币+2 2014-09-05 15:16:38
乙酸铵是弱酸弱碱盐,可以控制pH值  ,还可以改善峰形,尤其是在含氮生物碱样品分析时,铵根可以电离,竞争与色谱柱未被封端掩盖的硅醇基结合,降低色谱峰拖尾,仅代表个人看法
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
2楼2014-09-05 12:29:23
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
明媚角落15: 金币+3 2014-09-05 15:16:43
加入盐项作用挺多的,有的为了调节pH值,抑制或促进解离,使峰型尖锐,或者保留时间改变,有的为了提高体系的稳定性,尤其是溶液稳定性,也有的是为了钝化色谱柱,与目标物竞争色谱柱裸露的硅醇基,优化分离效果。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
3楼2014-09-05 14:27:35
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明媚角落15

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by voyager88 at 2014-09-05 12:29:23
乙酸铵是弱酸弱碱盐,可以控制pH值  ,还可以改善峰形,尤其是在含氮生物碱样品分析时,铵根可以电离,竞争与色谱柱未被封端掩盖的硅醇基结合,降低色谱峰拖尾,仅代表个人看法

我把盐换成水以后,为什么主峰出不来呢,液质检测没有出现目标产物?
4楼2014-09-05 15:34:19
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voyager88

金虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 明媚角落15 at 2014-09-05 15:34:19
我把盐换成水以后,为什么主峰出不来呢,液质检测没有出现目标产物?...

不会的,盐能出峰,水肯定也能出峰,只是说pH改变,离子强度改变后出峰时间不一样了,你再看看有没有别的原因。如果你是想监控反应什么的,其实你也可以用原来的流动相走,化合物出峰前不要让它进MS,快出峰的瞬间让它进MS,出完峰再切掉;仅代表个人看法
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
5楼2014-09-05 16:53:10
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

调整流动相极性,以促进不同极性化合物在色谱柱中的吸附洗脱能力强弱,同时可能对峰型的改善有所帮助!
gwmgyp
6楼2014-09-05 17:55:51
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zhesmaj

金虫 (小有名气)

分离的过程是吸附解离再吸附过程,在这个过程中主要是溶质-固定相的色散力和流动性-固定相色散力的竞争,楼主你没有加入乙酸铵,流动性的极性不足以置换溶质-固定相的色散力,溶质不会被洗脱出来,因此不会有主峰出现。
thegreatesttalkerisalwaystheleastdoner
7楼2014-09-09 00:08:11
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明媚角落15

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhesmaj at 2014-09-09 00:08:11
分离的过程是吸附解离再吸附过程,在这个过程中主要是溶质-固定相的色散力和流动性-固定相色散力的竞争,楼主你没有加入乙酸铵,流动性的极性不足以置换溶质-固定相的色散力,溶质不会被洗脱出来,因此不会有主峰出 ...

也就是说,调节乙腈和水的比例,还是可以洗脱出主产物峰的?
8楼2014-09-09 10:06:08
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Anual

铁虫 (初入文坛)

盐的作用不仅仅是调节pH,更多的时候是作为离子对,和目标产物集合,改变极性大小和离子强度,与柱子结合到一个适当的程度,这样就能通过改变流动性比例、极性大小(C18)与杂质分开。
如果少了盐不出风可能就是这样的原因,要不就是没有挂住,直接透过(图谱前端出现很高的透过峰),要不就是吸附太牢,洗脱不下来(可用高浓度乙腈冲洗,不如95%)。
9楼2014-09-09 17:20:07
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zhesmaj

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 明媚角落15 at 2014-09-09 10:06:08
也就是说,调节乙腈和水的比例,还是可以洗脱出主产物峰的?...

理论上是可以的,因为乙腈的溶剂溶剂强度因子较大,你增加乙腈的比例是可以将主峰洗脱出来的。这个比例你要自己去试。
thegreatesttalkerisalwaystheleastdoner
10楼2014-09-10 08:23:08
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