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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 对HPLC使用注意事项的一点疑惑
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

[交流] 对HPLC使用注意事项的一点疑惑 已有8人参与

刚才在网上看到这样一段话：

HPLC使用注意事项
1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜  过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

请问大家在跑hplc之前都会过滤吗？可是溶剂本身就是HPLC grade而且过滤的那个管子也不一定干净万一更多颗粒杂质进去怎么办···
还有就是第三条，不能用纯乙腈作为流动相，也就是说就算是跑梯度，也不能出现100%乙腈？那为什么最后清洗柱子的时候可以用100%乙腈？

贴上来大家讨论一下~~
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1楼 2014-01-08 14:35:38
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jct111111

金虫 (小有名气)
★
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1.为了保证实验结果干扰少和仪器的是用寿命最好使用HPLC级的试剂，过滤的话主要是针对水相来说的尤其是使用缓冲盐的时候。
2、超声波脱气势离线脱气的一种，主要目的是去除溶解在溶剂中的气体，防止溶剂混合的时候有气体出来。超声脱气建议只针对单一溶剂脱气，如果的混合好溶剂超声波脱气的话可能导致比例发生变化。
3、只是建议客户不要长期使用100%乙腈做为流动相，因为乙腈在高压条件下，粘度变大，导致单向阀运转发生问题，从而对实验结果造成影响。
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12楼2014-01-09 09:01:14
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小猫呢呢

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验室用的是莫克的流动相，没有过滤，但如果你要用的流动相含有盐离子，最好过滤。
有的实验室购买的液相本身就有在线脱气装置，可以不脱气。但还是建议先脱气，延长仪器使用寿命。
最好不要用100%乙腈冲洗柱子，你可以将乙腈含量升到95%，多冲一段时间
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傲不可长，欲不可纵，乐不可极，志不可满
2楼2014-01-08 14:52:33
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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
色谱纯的乙腈或甲醇不用过滤，出厂的时候已经过滤的很好的，可以超声后直接使用。
纯水如果是娃哈哈纯净水（小瓶装）可超生直接使用，其它你不清楚的品牌最好过滤超声后使用。
纯乙腈 可以直接作流动相，并切作为仪器及一般色谱柱的保护剂是不错的选择。
混合流动相最好要过滤并脱气再使用。
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5楼2014-01-08 15:52:14
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songyuze0319

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
怎么字成了那几个，我说的是：脱气一般是指超声脱气，purge是赶气泡。
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6楼2014-01-08 15:57:03
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yyall

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这边用的即使是色谱级的也都过滤了。并且水之前用过哇哈哈的，也经过过滤。
色谱级的没过滤的也用过。具体影响还没发现。不过有的试剂买回来的时候，会发现里面有可见异物。所以这边即使看不见可见异物，都会过滤。以防肉眼看不见的东西。
流动相用之前最好先脱气，有利于延长仪器寿命。
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做最仔细的分析工作，用细致甚微弥补学历不足
7楼2014-01-08 16:07:14
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fluffylee

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小猫呢呢 at 2014-01-08 14:52:33
我们实验室用的是莫克的流动相，没有过滤，但如果你要用的流动相含有盐离子，最好过滤。
有的实验室购买的液相本身就有在线脱气装置，可以不脱气。但还是建议先脱气，延长仪器使用寿命。
最好不要用100%乙腈冲洗柱 ...

非常感谢！你说的脱气就是purge吧？
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3楼2014-01-08 14:58:21
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songyuze0319

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by fluffylee at 2014-01-08 14:58:21
非常感谢！你说的脱气就是purge吧？...

打酱油的啊，唾弃是指超声透气，PURGE是赶气泡哦。
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4楼2014-01-08 15:44:11
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fluffylee

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jsys at 2014-01-08 15:52:14
色谱纯的乙腈或甲醇不用过滤，出厂的时候已经过滤的很好的，可以超声后直接使用。
纯水如果是娃哈哈纯净水（小瓶装）可超生直接使用，其它你不清楚的品牌最好过滤超声后使用。
纯乙腈 可以直接作流动相，并切作为 ...

谢谢斑竹！
我们实验室用的水是millipore，溶剂是fisher的。
我看Agilent给的使用小册子也说柱子保存在100%甲醇或者乙腈里，所以我原po的第三条说得对吗？
再次感谢！
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8楼2014-01-09 01:09:48
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fluffylee

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by songyuze0319 at 2014-01-08 15:57:03
怎么字成了那几个，我说的是：脱气一般是指超声脱气，purge是赶气泡。

哈哈~谢谢！话说 ls之前提到的在线脱气 是指prime吗？Agilent chemstation里pump的prime功能，一直不知道什么用处···

[ Last edited by fluffylee on 2014-1-9 at 01:17 ]
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9楼2014-01-09 01:15:00
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fluffylee

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yyall at 2014-01-08 16:07:14
这边用的即使是色谱级的也都过滤了。并且水之前用过哇哈哈的，也经过过滤。
色谱级的没过滤的也用过。具体影响还没发现。不过有的试剂买回来的时候，会发现里面有可见异物。所以这边即使看不见可见异物，都会过滤。 ...

了解了~~感谢！
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10楼2014-01-09 01:17:14
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