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fluffylee

铜虫 (小有名气)

[交流] 对HPLC使用注意事项的一点疑惑 已有8人参与

刚才在网上看到这样一段话:

HPLC使用注意事项
1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜  过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

请问大家在跑hplc之前都会过滤吗?可是溶剂本身就是HPLC grade而且过滤的那个管子也不一定干净万一更多颗粒杂质进去怎么办···
还有就是第三条,不能用纯乙腈作为流动相,也就是说就算是跑梯度,也不能出现100%乙腈?那为什么最后清洗柱子的时候可以用100%乙腈?

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jct111111

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1.为了保证实验结果干扰少和仪器的是用寿命最好使用HPLC级的试剂,过滤的话主要是针对水相来说的尤其是使用缓冲盐的时候。
2、超声波脱气势离线脱气的一种,主要目的是去除溶解在溶剂中的气体,防止溶剂混合的时候有气体出来。超声脱气建议只针对单一溶剂脱气,如果的混合好溶剂超声波脱气的话可能导致比例发生变化。
3、只是建议客户不要长期使用100%乙腈做为流动相,因为乙腈在高压条件下,粘度变大,导致单向阀运转发生问题,从而对实验结果造成影响。
12楼2014-01-09 09:01:14
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小猫呢呢

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们实验室用的是莫克的流动相,没有过滤,但如果你要用的流动相含有盐离子,最好过滤。
有的实验室购买的液相本身就有在线脱气装置,可以不脱气。但还是建议先脱气,延长仪器使用寿命。
最好不要用100%乙腈冲洗柱子,你可以将乙腈含量升到95%,多冲一段时间
傲不可长,欲不可纵,乐不可极,志不可满
2楼2014-01-08 14:52:33
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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
色谱纯的乙腈或甲醇不用过滤,出厂的时候已经过滤的很好的,可以超声后直接使用。
纯水如果是娃哈哈纯净水(小瓶装)可超生直接使用,其它你不清楚的品牌最好过滤超声后使用。
纯乙腈 可以直接作流动相,并切作为仪器及一般色谱柱的保护剂是不错的选择。
混合流动相最好要过滤并脱气再使用。
5楼2014-01-08 15:52:14
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songyuze0319

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
怎么字成了那几个,我说的是:脱气一般是指超声脱气,purge是赶气泡。
6楼2014-01-08 15:57:03
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yyall

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这边用的即使是色谱级的也都过滤了。并且水之前用过哇哈哈的,也经过过滤。
色谱级的没过滤的也用过。具体影响还没发现。不过有的试剂买回来的时候,会发现里面有可见异物。所以这边即使看不见可见异物,都会过滤。以防肉眼看不见的东西。
流动相用之前最好先脱气,有利于延长仪器寿命。
做最仔细的分析工作,用细致甚微弥补学历不足
7楼2014-01-08 16:07:14
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普通回帖

fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小猫呢呢 at 2014-01-08 14:52:33
我们实验室用的是莫克的流动相,没有过滤,但如果你要用的流动相含有盐离子,最好过滤。
有的实验室购买的液相本身就有在线脱气装置,可以不脱气。但还是建议先脱气,延长仪器使用寿命。
最好不要用100%乙腈冲洗柱 ...

非常感谢!你说的脱气就是purge吧?
3楼2014-01-08 14:58:21
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songyuze0319

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by fluffylee at 2014-01-08 14:58:21
非常感谢!你说的脱气就是purge吧?...

打酱油的啊,唾弃是指超声透气,PURGE是赶气泡哦。
4楼2014-01-08 15:44:11
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jsys at 2014-01-08 15:52:14
色谱纯的乙腈或甲醇不用过滤,出厂的时候已经过滤的很好的,可以超声后直接使用。
纯水如果是娃哈哈纯净水(小瓶装)可超生直接使用,其它你不清楚的品牌最好过滤超声后使用。
纯乙腈 可以直接作流动相,并切作为 ...

谢谢斑竹!
我们实验室用的水是millipore,溶剂是fisher的。
我看Agilent给的使用小册子也说柱子保存在100%甲醇或者乙腈里,所以我原po的第三条说得对吗?
再次感谢!
8楼2014-01-09 01:09:48
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by songyuze0319 at 2014-01-08 15:57:03
怎么字成了那几个,我说的是:脱气一般是指超声脱气,purge是赶气泡。

哈哈~谢谢!话说 ls之前提到的在线脱气 是指prime吗?Agilent chemstation里pump的prime功能,一直不知道什么用处···

[ Last edited by fluffylee on 2014-1-9 at 01:17 ]
9楼2014-01-09 01:15:00
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fluffylee

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yyall at 2014-01-08 16:07:14
这边用的即使是色谱级的也都过滤了。并且水之前用过哇哈哈的,也经过过滤。
色谱级的没过滤的也用过。具体影响还没发现。不过有的试剂买回来的时候,会发现里面有可见异物。所以这边即使看不见可见异物,都会过滤。 ...

了解了~~感谢!
10楼2014-01-09 01:17:14
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