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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 用HPLC想得到好的精密度，有什么注意事项
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范迪

金虫 (小有名气)

[求助] 用HPLC想得到好的精密度，有什么注意事项

我想问下，想保证HPLC有比较好的重现性，精密度，或者RSD值，有哪些注意事项呢？在网上查到的东西好少，求助各位大侠鸟~~~
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1楼 2012-06-06 12:04:43
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lijin79833

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-06 13:20:26
首先跟仪器的关系很大，主流品牌岛津、安捷伦、戴安、waters肯定没问题，其他的要考虑一下仪器本身是否精密度良好。
其次就是操作，重复性讲究进样量一定要准。想一切办法保证每次的进样量是准确的。中间精密度跟称量、配液、量瓶的校准都有关系，尽量一致。
最后就是图谱的处理，一定要采用同一组积分参数，尽量不要手动积分。
我想到的大概就这些。
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用心做好药
2楼2012-06-06 12:15:08
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-06 13:20:33
1、提倡使用自动进样器
2、自己做实验用的柱子，尽量不要混用。
3、流动相尽量每次现用现配，因有机相可能挥发。再就是如果需要调节PH，尽量每次调节准确。
4、色谱柱最好配上柱温箱。
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红颜远，相思苦，几番意，难相付。十年情思百年渡，不斩相思不忍顾！
3楼2012-06-06 13:10:06
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wellyuezi

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2012-06-06 17:57:16
范迪: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-06-07 20:25:40
我以前也做过一些关于重现性 精密度的试验，个人认为：
1.重现性，首先要保证机器的运行稳定，色谱柱的柱温箱是要有的，现在主流的仪器都会配备，其次，室内的温度对样品的重现性也有很大的影响，流动相通常会暴露在室内环境，如果变化会影响出峰时间。第三，样品的处理上也要注意，特别是一些易吸附，对光热敏感的样品要注意保存，我以前做过一个样品，溶解时间相差1分钟，含量差了将近20%。第四，对于主成分含量很少的样品，稀释过程一定要注意，取样枪头的吸附会产生巨大地影响，稀释的步骤要尽量少，最好一步到位。第五，进针手法，对于进样环进样，每次的吸取量要达到进样环的3倍以上，且每次要求一致。进样过程要缓慢，使进样环内的流动相排干净。少量进样时要求每次的取样量一定要稳。
2.精密度，这一个项目主要还是看设备，专门的色谱柱对应专门的产品，色谱柱柱效的好坏对精密度有影响，另外一个好的流动相的配比等一会产生一些影响。
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4楼2012-06-06 13:42:46
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hhw_123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-06-06 17:57:23
这些实验只要保持室温及柱温稳定。同一天重复性和精密度实验的RSD一般会有保证的。（前提是流动相要混匀，柱压稳定）。
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5楼2012-06-06 17:25:19
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范迪

金虫 (小有名气)
好的，谢谢各位啦~\(≧▽≦)/~
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6楼2012-06-07 20:24:21
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