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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » HPLC流动相的盐溶液有什么作用
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明媚角落15

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC流动相的盐溶液有什么作用 已有2人参与

请教各位虫友，在HPLC中，流动相的盐溶液有什么作用呢？我原本的流动相是乙酸铵溶液和乙腈梯度洗脱，但是把乙酸铵换成水梯度不变，没有出现主峰啊，这是为什么呢？
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1楼 2014-09-05 11:34:38
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
明媚角落15: 金币+2 2014-09-05 15:16:38
乙酸铵是弱酸弱碱盐，可以控制pH值  ，还可以改善峰形，尤其是在含氮生物碱样品分析时，铵根可以电离，竞争与色谱柱未被封端掩盖的硅醇基结合，降低色谱峰拖尾，仅代表个人看法
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2楼2014-09-05 12:29:23
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
明媚角落15: 金币+3 2014-09-05 15:16:43
加入盐项作用挺多的，有的为了调节pH值，抑制或促进解离，使峰型尖锐，或者保留时间改变，有的为了提高体系的稳定性，尤其是溶液稳定性，也有的是为了钝化色谱柱，与目标物竞争色谱柱裸露的硅醇基，优化分离效果。
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
3楼2014-09-05 14:27:35
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明媚角落15

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by voyager88 at 2014-09-05 12:29:23
乙酸铵是弱酸弱碱盐，可以控制pH值  ，还可以改善峰形，尤其是在含氮生物碱样品分析时，铵根可以电离，竞争与色谱柱未被封端掩盖的硅醇基结合，降低色谱峰拖尾，仅代表个人看法

我把盐换成水以后，为什么主峰出不来呢，液质检测没有出现目标产物？
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4楼2014-09-05 15:34:19
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voyager88

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 明媚角落15 at 2014-09-05 15:34:19
我把盐换成水以后，为什么主峰出不来呢，液质检测没有出现目标产物？...

不会的，盐能出峰，水肯定也能出峰，只是说pH改变，离子强度改变后出峰时间不一样了，你再看看有没有别的原因。如果你是想监控反应什么的，其实你也可以用原来的流动相走，化合物出峰前不要让它进MS，快出峰的瞬间让它进MS，出完峰再切掉；仅代表个人看法
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5楼2014-09-05 16:53:10
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主
调整流动相极性，以促进不同极性化合物在色谱柱中的吸附洗脱能力强弱，同时可能对峰型的改善有所帮助！
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gwmgyp
6楼2014-09-05 17:55:51
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zhesmaj

金虫 (小有名气)
分离的过程是吸附解离再吸附过程，在这个过程中主要是溶质-固定相的色散力和流动性-固定相色散力的竞争，楼主你没有加入乙酸铵，流动性的极性不足以置换溶质-固定相的色散力，溶质不会被洗脱出来，因此不会有主峰出现。
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thegreatesttalkerisalwaystheleastdoner
7楼2014-09-09 00:08:11
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明媚角落15

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhesmaj at 2014-09-09 00:08:11
分离的过程是吸附解离再吸附过程，在这个过程中主要是溶质-固定相的色散力和流动性-固定相色散力的竞争，楼主你没有加入乙酸铵，流动性的极性不足以置换溶质-固定相的色散力，溶质不会被洗脱出来，因此不会有主峰出 ...

也就是说，调节乙腈和水的比例，还是可以洗脱出主产物峰的？
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8楼2014-09-09 10:06:08
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Anual

铁虫 (初入文坛)
盐的作用不仅仅是调节pH，更多的时候是作为离子对，和目标产物集合，改变极性大小和离子强度，与柱子结合到一个适当的程度，这样就能通过改变流动性比例、极性大小（C18）与杂质分开。
如果少了盐不出风可能就是这样的原因，要不就是没有挂住，直接透过（图谱前端出现很高的透过峰），要不就是吸附太牢，洗脱不下来（可用高浓度乙腈冲洗，不如95%）。
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9楼2014-09-09 17:20:07
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zhesmaj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 明媚角落15 at 2014-09-09 10:06:08
也就是说，调节乙腈和水的比例，还是可以洗脱出主产物峰的？...

理论上是可以的，因为乙腈的溶剂溶剂强度因子较大，你增加乙腈的比例是可以将主峰洗脱出来的。这个比例你要自己去试。
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thegreatesttalkerisalwaystheleastdoner
10楼2014-09-10 08:23:08
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