| 查看: 6940 | 回复: 97 | |||
shxteacher铁杆木虫 (正式写手)
|
[交流]
PYD1重组质粒转化酿酒酵母后为什么长出的阳性斑PCR扩不出目的片段？ 已有1人参与
|
|
跟别人交换了pYD1酿酒酵母质粒，按照pYD1的操作手册，将目的基因连接至pYD1，构建好了重组质粒，并测序验证正确。 然后木有线性化（根据操作手册中的描述，不需要线性化），直接转入EBY100酿酒酵母感受态细胞中， 用Trp-（色氨酸缺陷）平板筛选，能长出粉色菌落，本人不知道是否正确？但是EBY100感受态细胞无法在trp-平板上长出菌落。 然后挑取单菌落，转至trp-液体培养基中培养，培养物离心后，依旧是粉色培养物。 但是用试剂盒提取基因组后，却无法PCR得到我目的基因片段，为什么PCR不出来？ （pYD1酿酒酵母质粒 和 EBY100均是跟别人换来的） 不知道各位科研同仁遇到这样的情况木有？ 请各位大虾给点指点，实在想不通，万分感谢。  pYD1重组质粒转化后的粉色菌落.png |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有96人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 菌液pcr鉴定毕赤酵母重组结果
已经有3人回复
- 质粒构建，挑单菌落验证总是假阳性，求分析原因？！
已经有29人回复
- PET-32A重组质粒构建
已经有20人回复
- 细菌质粒提取浓度太低求助
已经有29人回复
- 大神救命！！！菌液PCR 出来酶切质粒没有目的条带
已经有5人回复
- 转化涂板长不出单菌落
已经有17人回复
- 连接转化假阳性提不出来质粒吗？
已经有8人回复
- 转化后单克隆都一样吗
已经有13人回复
- 转化后菌液PCR鉴定，没有目的条带
已经有15人回复
- 酿酒酵母基因敲除实验顺利需多少时间
已经有22人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
已经有7人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 关于毕赤酵母电转化
已经有10人回复
- 可以环形质粒直接做模板吗
已经有8人回复
- 在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？
已经有10人回复
- 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
已经有4人回复
- 【求助/交流】怎样区分空载和重组质粒？
已经有9人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
 |
2楼2014-08-29 18:42:37
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
 |
3楼2014-08-29 18:42:55
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
 |
4楼2014-08-29 18:43:03
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
 |
5楼2014-08-29 18:43:11
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
|
|
6楼2014-08-29 18:43:39
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
|
|
7楼2014-08-29 18:48:25
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
|
|
8楼2014-08-29 18:48:34
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
|
|
9楼2014-08-29 18:48:44
★
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
shxteacher(金币+1): 谢谢参与
|
|
10楼2014-08-29 18:48:53
10