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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC保留时间提前了
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穆氖毅

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC保留时间提前了 已有3人参与

马上上研一，在做一个已经毕业的师兄做的一个课题。最近样品跑出来的峰比大概3个月以前时保留时间提前了一分半钟，后来跑了一样标准品，果然提前了。请问 这种情况需要再做一个标准曲线吗？如果做标准曲线的话可以配一个浓度然后按不同进样量，最后再换算成不同浓度吗？最重要一个问题，保留时间为什么会提前呢？流动相以及仪器全都没变，只是大概3个月没有跑了而已，机器其他人也在用。洗柱子的时候发现跑出来的基线很平，也不是柱子的问题。真是不懂为何会不一样呢？
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1楼 2014-08-28 17:53:25
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-30 17:16:39
1.标准曲线最好配不同浓度的样品进样，相对于此，进样针的误差实在是太大了，因为不同的进样体积，误差是不一样的。
2.流动相是新配的么？如果是新配的，检查一下有没有配错。
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铁甲依然在
2楼2014-08-28 18:48:21
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yj315621949

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-30 17:16:44
如果你用的机子是自动进样机就可以按照你说的做。
第二个，出峰时间提前也可能是你的柱子压力发生了改变，压力也是会影响出峰时间的
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3楼2014-08-28 21:02:47
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穆氖毅

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2014-08-28 18:48:21
1.标准曲线最好配不同浓度的样品进样，相对于此，进样针的误差实在是太大了，因为不同的进样体积，误差是不一样的。
2.流动相是新配的么？如果是新配的，检查一下有没有配错。

我们用的是自动进样器，误差还大吗？流动相是新配的，也没有错！
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4楼2014-08-29 09:02:53
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匿名

禁虫 (知名作家)
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-30 17:16:50
本帖仅楼主可见
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5楼2014-08-29 12:20:43
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匿名

禁虫 (知名作家)
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-30 17:16:56
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6楼2014-08-29 12:22:15
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赵素会

新虫 (初入文坛)
★
xiaoxiao270: 金币+1, 谢谢应助 2014-08-30 17:17:10
首先流动相应该新鲜配制，标准品和样品保留时间一致就可以了，不必重新做，因为有可能是机器和环境的原因，做标准曲线可以像你说的那样换算
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7楼2014-08-30 16:04:08
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-30 17:17:15
没有必要再做一遍标准曲线；色谱峰飘逸原因很多，可能是流动相配制不太一致
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微信公众号：Pharmaguider（药事纵横），主页：www.pharmaguider.cn
8楼2014-08-30 16:12:01
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小元88

新虫 (正式写手)
有没有加酸，有的话可能没完全混匀，再就是上面说的温度或柱子的问题（我只做过几次，瞎猜的）
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9楼2014-09-01 19:38:18
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问梦下一站

金虫 (正式写手)
1.时间长了，要更换流动相，流动相变化，对保留时间肯定有影响，2.对于同一样品，当标品和样品都发生变化时，用你自己做的，实验的时效性，3.做标准曲线，一般选用不同浓度同一体积样品量，便于数据处理和稳定性的考察

[ 发自小木虫客户端 ]
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Nuts~
10楼2014-09-01 20:31:27
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