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有关茚三酮测氨基酸的一些问题请教已有2人参与
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本人最近在做茚三酮测氨基酸实验，所测氨基酸是来自昆虫体内的，用过两种方法提取①10%的乙酸匀浆，②95%的乙醇匀浆。最后提取出来的提取液和茚三酮水浴加热都显色。 但需要解决的问题是，①在沸水浴加热过程中（15min)，反应产生的二氧化碳和氨气非常剧烈，加塞后液体依然嘣的到处都是，有时还会把玻璃塞直接顶出，我也经常被嘣的满身茚三酮紫紫的，之后每个试管中加入沸石依然嘣的很厉害，想知道大家是如何解决这个问题的？ ②还有水浴后颜色很浓，用60%的乙醇稀释后依然颜色很深，分光光度测出来的数据没有什么曲线，很郁闷，想问下大家这个怎么解决？还有水浴后蒸发很严重，有些试管中的液体根本不够测OD值。 加一个本人的实验步骤，若有错误，希望大家能告知。 0.05g虫粉+0.5ml10%乙酸（或95%乙醇）匀浆，匀浆液转移到10ml离心管中，用7ml超纯水冲洗匀浆器，冲洗液一并转移到离心管中进行混匀，并于6000r/min,离心10min后取上清定容至10ml，吸取定溶液1ml，放入20ml戴塞试管中，加1ml超纯水，加0.1ml 0.1%的抗坏血酸溶液和3ml茚三酮试剂，570nm比色。 2%茚三酮 :2g茚三酮加入100ml无水乙醇。 麻烦做过这个实验有经验的大神们多多给点指导啊  |
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