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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 茚三酮比色法测总游离氨基酸
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)

[求助] 茚三酮比色法测总游离氨基酸 已有1人参与

请问测禾草的总游离氨基酸是用干样还是鲜样？
具体的实验方法。
谢谢大神。
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1楼 2014-04-01 15:40:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
半壁蔷薇: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-02 13:43:26
测总游离氨基酸需要用鲜样，具体做法很多实验指导书上都有，网上也有很多资源，譬如
http://202.198.0.21/nongxue/lesson/shengli/syzd_27.htm
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2楼2014-04-01 20:03:30
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chenjuan309

金虫 (小有名气)
记得要做标准曲线，楼上的已经提供了很好的方法，值得参考
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3楼2014-04-04 10:20:10
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenjuan309 at 2014-04-04 10:20:10
记得要做标准曲线，楼上的已经提供了很好的方法，值得参考

谢谢噢。
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4楼2014-04-08 19:33:24
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-04-01 20:03:30
测总游离氨基酸需要用鲜样，具体做法很多实验指导书上都有，网上也有很多资源，譬如
http://202.198.0.21/nongxue/lesson/shengli/syzd_27.htm

亲，我按照你那个实验步骤，乙酸－乙酸钠缓冲液配不出来呢。就是粘糊状，然后我又按分子书上的更改配好了ph5.4的缓冲液。但是做标曲的时候不显色。我的手上不小心沾上了都染上颜色了。
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5楼2014-04-10 09:26:33
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starseacow

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引用回帖:
5楼: Originally posted by 半壁蔷薇 at 2014-04-10 09:26:33
亲，我按照你那个实验步骤，乙酸－乙酸钠缓冲液配不出来呢。就是粘糊状，然后我又按分子书上的更改配好了ph5.4的缓冲液。但是做标曲的时候不显色。我的手上不小心沾上了都染上颜色了。...

以后做实验养成戴手套的习惯吧
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6楼2014-04-10 16:08:46
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by starseacow at 2014-04-10 16:08:46
以后做实验养成戴手套的习惯吧...

其实我是想问我怎样才能让氨基酸显色，重点不在手哦。
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7楼2014-04-10 17:10:58
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
你所说的不显色，是用分光光度计也测不出变化么？如果确实没有变化，准备一些已知蛋白或可显色反应氨基酸配成溶液，用这个体系测一下，可以检查一下体系是否正常工作。你做完这些检查以后，可以再进一步探讨哪里有问题
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8楼2014-04-10 17:31:32
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by starseacow at 2014-04-10 17:31:32
你所说的不显色，是用分光光度计也测不出变化么？如果确实没有变化，准备一些已知蛋白或可显色反应氨基酸配成溶液，用这个体系测一下，可以检查一下体系是否正常工作。你做完这些检查以后，可以再进一步探讨哪里有问 ...

已经用已知的氨基酸（亮氨酸）测定，在300ug／ml下能够显色，od值为0.315，但是用我的鲜样（禾草）磨碎后定容到50ml，取1-10ml都不显色。就连紫色都没有，更别提用分光光度计测量了。
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9楼2014-04-12 11:44:48
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 半壁蔷薇 at 2014-04-12 11:44:48
已经用已知的氨基酸（亮氨酸）测定，在300ug／ml下能够显色，od值为0.315，但是用我的鲜样（禾草）磨碎后定容到50ml，取1-10ml都不显色。就连紫色都没有，更别提用分光光度计测量了。...

提取方法会不会有问题，可以试试换个别的植物材料提一下，测测有没变化
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10楼2014-04-12 16:31:17
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