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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)

[求助] 茚三酮比色法测总游离氨基酸已有1人参与

请问测禾草的总游离氨基酸是用干样还是鲜样?
具体的实验方法。
谢谢大神。
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starseacow

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
半壁蔷薇: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-02 13:43:26
测总游离氨基酸需要用鲜样,具体做法很多实验指导书上都有,网上也有很多资源,譬如
http://202.198.0.21/nongxue/lesson/shengli/syzd_27.htm
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2楼2014-04-01 20:03:30
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chenjuan309

金虫 (小有名气)

记得要做标准曲线,楼上的已经提供了很好的方法,值得参考
3楼2014-04-04 10:20:10
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenjuan309 at 2014-04-04 10:20:10
记得要做标准曲线,楼上的已经提供了很好的方法,值得参考

谢谢噢。
4楼2014-04-08 19:33:24
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-04-01 20:03:30
测总游离氨基酸需要用鲜样,具体做法很多实验指导书上都有,网上也有很多资源,譬如
http://202.198.0.21/nongxue/lesson/shengli/syzd_27.htm

亲,我按照你那个实验步骤,乙酸-乙酸钠缓冲液配不出来呢。就是粘糊状,然后我又按分子书上的更改配好了ph5.4的缓冲液。但是做标曲的时候不显色。我的手上不小心沾上了都染上颜色了。
5楼2014-04-10 09:26:33
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starseacow

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引用回帖:
5楼: Originally posted by 半壁蔷薇 at 2014-04-10 09:26:33
亲,我按照你那个实验步骤,乙酸-乙酸钠缓冲液配不出来呢。就是粘糊状,然后我又按分子书上的更改配好了ph5.4的缓冲液。但是做标曲的时候不显色。我的手上不小心沾上了都染上颜色了。...

以后做实验养成戴手套的习惯吧
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6楼2014-04-10 16:08:46
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)

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6楼: Originally posted by starseacow at 2014-04-10 16:08:46
以后做实验养成戴手套的习惯吧...

其实我是想问我怎样才能让氨基酸显色,重点不在手哦。
7楼2014-04-10 17:10:58
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starseacow

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你所说的不显色,是用分光光度计也测不出变化么?如果确实没有变化,准备一些已知蛋白或可显色反应氨基酸配成溶液,用这个体系测一下,可以检查一下体系是否正常工作。你做完这些检查以后,可以再进一步探讨哪里有问题
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8楼2014-04-10 17:31:32
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半壁蔷薇

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by starseacow at 2014-04-10 17:31:32
你所说的不显色,是用分光光度计也测不出变化么?如果确实没有变化,准备一些已知蛋白或可显色反应氨基酸配成溶液,用这个体系测一下,可以检查一下体系是否正常工作。你做完这些检查以后,可以再进一步探讨哪里有问 ...

已经用已知的氨基酸(亮氨酸)测定,在300ug/ml下能够显色,od值为0.315,但是用我的鲜样(禾草)磨碎后定容到50ml,取1-10ml都不显色。就连紫色都没有,更别提用分光光度计测量了。
9楼2014-04-12 11:44:48
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starseacow

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9楼: Originally posted by 半壁蔷薇 at 2014-04-12 11:44:48
已经用已知的氨基酸(亮氨酸)测定,在300ug/ml下能够显色,od值为0.315,但是用我的鲜样(禾草)磨碎后定容到50ml,取1-10ml都不显色。就连紫色都没有,更别提用分光光度计测量了。...

提取方法会不会有问题,可以试试换个别的植物材料提一下,测测有没变化
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10楼2014-04-12 16:31:17
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