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FLOAT1990

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关茚三酮测氨基酸的一些问题请教 已有2人参与

本人最近在做茚三酮测氨基酸实验,所测氨基酸是来自昆虫体内的,用过两种方法提取①10%的乙酸匀浆,②95%的乙醇匀浆。最后提取出来的提取液和茚三酮水浴加热都显色。
但需要解决的问题是,①在沸水浴加热过程中(15min),反应产生的二氧化碳和氨气非常剧烈,加塞后液体依然嘣的到处都是,有时还会把玻璃塞直接顶出,我也经常被嘣的满身茚三酮紫紫的,之后每个试管中加入沸石依然嘣的很厉害,想知道大家是如何解决这个问题的?
②还有水浴后颜色很浓,用60%的乙醇稀释后依然颜色很深,分光光度测出来的数据没有什么曲线,很郁闷,想问下大家这个怎么解决?还有水浴后蒸发很严重,有些试管中的液体根本不够测OD值。

加一个本人的实验步骤,若有错误,希望大家能告知。
0.05g虫粉+0.5ml10%乙酸(或95%乙醇)匀浆,匀浆液转移到10ml离心管中,用7ml超纯水冲洗匀浆器,冲洗液一并转移到离心管中进行混匀,并于6000r/min,离心10min后取上清定容至10ml,吸取定溶液1ml,放入20ml戴塞试管中,加1ml超纯水,加0.1ml 0.1%的抗坏血酸溶液和3ml茚三酮试剂,570nm比色。

2%茚三酮 :2g茚三酮加入100ml无水乙醇。


麻烦做过这个实验有经验的大神们多多给点指导啊
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赖穗0911

新虫 (小有名气)

你好 看到你的问题我深有体会,现在问题解决了吗或者有其他的方法吗,能否和你详细的探讨交流呢

[ 发自小木虫客户端 ]
求解答
2楼2015-04-13 13:46:14
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gaoxiang1230

新虫 (小有名气)

3楼2016-04-22 09:50:08
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匿名

用户注销 (初入文坛)

本帖仅楼主可见
4楼2017-07-14 20:40:16
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安妮十一月

铁虫 (初入文坛)

想问一下楼主,那个匀浆机可以用作植物吗,0.5ml的提取液匀浆,是什么微量匀浆机吗?
5楼2017-08-30 11:12:03
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yamightiness

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

乙醇应该不是起到稀释的作用
我是拿PCR做的,线性还可以
6楼2017-12-27 16:07:53
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