24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1262  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yangyang1991

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 转基因PCR检测,为啥有些带亮,有些不亮? 已有4人参与

之前加正反引物0.4没有后来加1的亮。是不是因为引物量少的原因?还是其他什么?
又或者是模板的原因?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangyang1991

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
6楼: Originally posted by happydove at 2014-08-06 16:04:11
首先不太清楚你扩增的是否为外源基因,如果是,有一个原因可以解释。
拷贝数越高的,扩增的是不是会很亮呢。
你说的引物浓度问题,是同一批引物扩增同一个模板吗?

我今天试了下,增加循环次数,扩增的亮度没有改变。是同一批引物扩增同一个模板,扩增的是之前转入的过表达的基因。很纠结,一直检测的数量不够,没法往下做。。。
7楼2014-08-06 22:49:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

songzuowei

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-06 09:28:31
yangyang1991: 金币+1, 有帮助 2014-08-06 14:36:07
引物加少的话确实影响条带的亮度 这个我做过实验
3楼2014-08-06 08:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peak-chen

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991: 金币+1, 有帮助, 用的就是20ul的体系,之前加0.4,这次加0.8,条带比之前亮,并且多出现几条带,但是很不明显!想问下,如何改进。。。 2014-08-06 14:41:12
20ul体系,,,上下游引物在0.8-1ul...可以混合管,,一起加,,,比较不会因为误差
4楼2014-08-06 09:53:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wszl666

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991: 金币+2, ★★★很有帮助, 用的就是20ul的体系,之前加0.4,这次加0.8,条带比之前亮,并且多出现几条带,但是很不明显!想问下,如何改进。。。 2014-08-06 14:41:30
用基因组做PCR本身就有这个问题,另外转基因的拷贝数也会有影响
基因敲除
5楼2014-08-06 10:45:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +23 lllllos 2026-03-30 23/1150 2026-04-01 01:34 by 1018329917
[考研] 335求调剂 +3 321* 2026-03-31 4/200 2026-04-01 00:00 by 321*
[考研] 08工科275分求调剂 +6 AaAa7420 2026-03-31 6/300 2026-03-31 21:27 by XBbbb13
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +3 元元青青 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:58 by vgtyfty
[考研] 085601英二数二求调剂 总分325 +4 余航航 2026-03-31 4/200 2026-03-31 17:38 by 唐沐儿
[考研] 080500-315分复试调剂 +9 上岸3821 2026-03-31 9/450 2026-03-31 17:29 by 唐沐儿
[考研] 330分求调剂 +6 qzenlc 2026-03-29 6/300 2026-03-31 16:44 by Wang200018
[考研] 362求调剂 +9 西南交材料专硕3 2026-03-31 9/450 2026-03-31 16:25 by w虫虫123
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 13/650 2026-03-31 14:58 by 王亮_大连医科大
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +10 一定上岸aaa 2026-03-27 14/700 2026-03-31 10:47 by foria
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
[考研] 材料与化工调剂一志愿大连海事085600,349 +6 吃的不少 2026-03-30 6/300 2026-03-31 04:17 by fmesaito
[考研] 281求调剂 +5 亚克西good 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:42 by dophin1985
[考研] 抱歉 +3 田洪有 2026-03-30 3/150 2026-03-30 19:11 by 迷糊CCPs
[考研] 297求调剂 +17 田洪有 2026-03-26 18/900 2026-03-30 18:32 by nothing投稿中
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
[考研] 348求调剂 +6 小懒虫不懒了 2026-03-28 6/300 2026-03-30 10:29 by Evan_Liu
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 一志愿郑大085600,310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见