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鲨鱼999

木虫 (小有名气)

[求助] 纤维素酶的纯化已有2人参与

请问各位大神,纤维素酶透析后,用考马斯亮蓝测蛋白质含量时,空白的OD值为0.3以上,正常吗?标曲最大值是0.5,整个标曲的区间只有2,会太小了吗?
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-01 09:17:43
鲨鱼999: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2014-08-01 21:31:17
你试着做标准曲线,保证相关系数达到0.995,看看它的测定区间有多大。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2014-07-26 13:57:55
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鲨鱼999

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-07-26 13:57:55
你试着做标准曲线,保证相关系数达到0.995,看看它的测定区间有多大。

标曲的区间是0.33到0.79,相关系数是0.997,点的是100ul 的酶标板。
3楼2014-07-31 14:16:59
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chenjiong1119

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-01 09:17:58
鲨鱼999: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2014-08-01 21:31:41
空白OD值高啊,标准曲线的最高点的OD值低啊,标准曲线再浓一点吧,空白很高。
4楼2014-07-31 20:09:44
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
3楼: Originally posted by 鲨鱼999 at 2014-07-31 14:16:59
标曲的区间是0.33到0.79,相关系数是0.997,点的是100ul 的酶标板。...

相关系数挺好,但是上限没有达到0.995,理论上超出标曲上限和下限的读数都不能用标曲来计算的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2014-07-31 20:25:36
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鲨鱼999

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenjiong1119 at 2014-07-31 20:09:44
空白OD值高啊,标准曲线的最高点的OD值低啊,标准曲线再浓一点吧,空白很高。

浓度增大,OD值就超过1了,准确度就下降了啊!!!!!!
6楼2014-08-01 21:33:38
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鲨鱼999

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-07-31 20:25:36
相关系数挺好,但是上限没有达到0.995,理论上超出标曲上限和下限的读数都不能用标曲来计算的。...

就是标曲的浓度还可以增大是吗?
7楼2014-08-01 22:08:35
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
7楼: Originally posted by 鲨鱼999 at 2014-08-01 22:08:35
就是标曲的浓度还可以增大是吗?...

只要你的相关系数足够漂亮,就肯定准确了。打个比方:一把尺子量程为1米,你就可以用它来测1米以内长度的东西,但你现在可能只是用来测0.5米长度的而已。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2014-08-01 22:11:01
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鲨鱼999

木虫 (小有名气)

如果点板点的是150ul的话、就能达到0.9、但是起点好高、达到0.6了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2014-08-02 09:18:42
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鲨鱼999

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-08-01 22:11:01
只要你的相关系数足够漂亮,就肯定准确了。打个比方:一把尺子量程为1米,你就可以用它来测1米以内长度的东西,但你现在可能只是用来测0.5米长度的而已。...

大神,我想问问你,你做过双水相吗?我现在正在做,但是提取出来的酶没有酶活,怎么办?
10楼2014-08-03 15:47:09
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