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hxiaopeng

新虫 (小有名气)

[交流] 求助,PAGE电泳图弯曲,迫切需哪位高手的指导已有7人参与

本人跑聚丙烯酰胺电泳,之前的都没问题,这几天的却总是跑成这样,是怎么回事?求大家帮助指点
1、刚开始以为是胶的问题,重新配胶,结果却仍是如此。
2、电压85V,
(刚刚再次用之前能够跑出典型带型的样点样电泳,同样的胶、同样的电泳液、同样的电压、同样的电泳槽,居然又正常,又不会发生弯曲了。疑问:是不是因为PCR的问题?)

求助,PAGE电泳图弯曲,迫切需哪位高手的指导
还在玻璃板上时的情形(都已成这样了,继续染色也没什么意义)


求助,PAGE电泳图弯曲,迫切需哪位高手的指导-1
染色后的结果,一塌糊涂,连之前跑过的能出典型带型的样也模糊不清了。

[ Last edited by hxiaopeng on 2014-7-17 at 21:28 ]
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ysdentist

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能原因(1)你放电泳槽的时候两侧是否用手指稍用力下压,确保电泳槽封闭严密;(2)loading buffer不好,或电泳液反复使用次数太多;(3)胶自己灌的话是否配比加的正确,配好后,用之前用自来水冲下,注意别破坏梳子的部分;(4)我用的电压是80v,15min,100v,1h,(5)你gel-loading的时候注意tip位置。我们实验室的同学发生过类似的情况,我给重做就没事,你也可以让你们实验室的人帮忙重做下,你在旁边仔细观察,也许发现问题。祝你好运。
Larry
11楼2014-07-18 21:44:52
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