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hxiaopeng

新虫 (小有名气)

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[交流] 求助，PAGE电泳图弯曲，迫切需哪位高手的指导已有7人参与

本人跑聚丙烯酰胺电泳，之前的都没问题，这几天的却总是跑成这样，是怎么回事？求大家帮助指点
1、刚开始以为是胶的问题，重新配胶，结果却仍是如此。
2、电压85V，
（刚刚再次用之前能够跑出典型带型的样点样电泳，同样的胶、同样的电泳液、同样的电压、同样的电泳槽，居然又正常，又不会发生弯曲了。疑问：是不是因为PCR的问题？）

还在玻璃板上时的情形（都已成这样了，继续染色也没什么意义）

染色后的结果，一塌糊涂，连之前跑过的能出典型带型的样也模糊不清了。

[ Last edited by hxiaopeng on 2014-7-17 at 21:28 ]

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1楼 2014-07-17 16:13:05

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ysdentist

金虫 (小有名气)

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专业: 口腔颌面组织生物力学和生

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

可能原因（1）你放电泳槽的时候两侧是否用手指稍用力下压，确保电泳槽封闭严密；（2）loading buffer不好，或电泳液反复使用次数太多；（3）胶自己灌的话是否配比加的正确，配好后，用之前用自来水冲下，注意别破坏梳子的部分；（4）我用的电压是80v,15min，100v,1h，（5）你gel-loading的时候注意tip位置。我们实验室的同学发生过类似的情况，我给重做就没事，你也可以让你们实验室的人帮忙重做下，你在旁边仔细观察，也许发现问题。祝你好运。