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汕头大学海洋科学接受调剂
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biofind

新虫 (小有名气)

[求助] 重金求助荧光定量扩增曲线不呈S型,呈直线型,是什么原因? 已有4人参与

我做染料法荧光定量RT-PCR。标准品没问题,曲线都呈S型。但是我的未知病毒样品结果不是S型,反而是直线型(熔解曲线没问题和标准品的一样)。
请问这是什么原因,这种扩增曲线是直线的,似乎达不到平台期的,结果可不可靠?

重金求助荧光定量扩增曲线不呈S型,呈直线型,是什么原因?
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biofind

新虫 (小有名气)

是这个原因吗?那我扩增标准品的曲线一点没问题
3楼2014-07-12 14:13:57
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sdutan

新虫 (初入文坛)

送你四个大字:“引物不行!”
2楼2014-07-12 06:37:05
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violetice

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
biofind(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-12 16:47:57
你的样本是什么?是不是核酸提取过程中样本中的某些抑制成分没有去除干净啊?把核酸再纯化下试试

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-07-12 16:23:16
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biofind

新虫 (小有名气)

样本是转染质粒,拯救病毒用的。因此里面含有病毒RNA和转染质粒。
我先用DNA酶处理了,然后提RNA,做反转录,然后做qRT-PCR
5楼2014-07-14 07:50:30
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