应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 蛋白中巯基和二硫键的测定
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 5072  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

nisiying0701

木虫 (正式写手)

stan

[求助] 蛋白中巯基和二硫键的测定 已有2人参与

测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。
巯基含量的计算公式如下：
SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C
式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值
D—稀释倍数
C—样品浓度（mg/mL）

请教各位大神，这种方法中稀释倍数（D）和样品浓度（C）是多少？怎么得出的？万分感谢！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
whatdoesn'tkillyoumakesyoustronger.
1楼 2014-07-10 00:28:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1012203014

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 一点灵性 at 2015-07-27 17:32:06
有，就是采用烷基化试剂碘代乙酰胺和碘代乙酸钠的试剂，在二者不同比例条件下可以打开不同的二硫键，然后在Native page gel上可以看到不同的band，从而定量。...

您好，我最近也需要测这个你那有相关的文献，或者你是在北京吗？我去跟你学学谢谢
赞一下 回复此楼
奋斗！永不止步！
7楼2015-08-27 08:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nisiying0701: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-07-10 16:52:46
样品浓度C=样品的量（15mg）/溶液体积（5ml）=3mg/ml
稀释倍数D是自己定的，根据你的样品中巯基的含量不同合适的稀释倍数不同。就是3mg/ml的样品稀释D倍后，反应后测定得到的吸光值比较合适（一般0.2-0.8）。
赞一下 回复此楼
2楼2014-07-10 08:38:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nisiying0701

木虫 (正式写手)

stan
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-07-10 08:38:33
样品浓度C=样品的量（15mg）/溶液体积（5ml）=3mg/ml
稀释倍数D是自己定的，根据你的样品中巯基的含量不同合适的稀释倍数不同。就是3mg/ml的样品稀释D倍后，反应后测定得到的吸光值比较合适（一般0.2-0.8）。

如果按样品浓度3mg/ml正好合适，就不用稀释，即稀释倍数即为1是吗？
赞一下 回复此楼
whatdoesn'tkillyoumakesyoustronger.
3楼2014-07-10 16:54:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by nisiying0701 at 2014-07-10 16:54:55
如果按样品浓度3mg/ml正好合适，就不用稀释，即稀释倍数即为1是吗？...

对，是的。如果初始浓度合适，稀释倍数即为1。
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-10 21:08:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工科求调剂286 +4 tgs_001 2026-03-28 4/200 2026-03-30 21:03 by dophin1985
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +12 辰沐5211314 2026-03-26 12/600 2026-03-30 19:28 by Wang200018
[考研] 材料学硕333求调剂 +14 北道巷 2026-03-24 14/700 2026-03-30 18:59 by 源_2020
[考研] 292求调剂 +13 是妍子也是研子 2026-03-30 13/650 2026-03-30 18:01 by 小徐0109
[考研] 材料化工340求调剂 +3 jhx777 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:54 by JourneyLucky
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +7 nhj_ 2026-03-25 7/350 2026-03-30 12:44 by fangnagu
[考研] 070300一志愿211，312分求调剂院校 +4 小黄鸭宝 2026-03-30 4/200 2026-03-30 11:49 by 棒棒球手
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 356求调剂 +3 gysy?s?a 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:33 by 544594351
[考研] 286求调剂 +4 丢掉懒惰 2026-03-27 7/350 2026-03-28 08:07 by baoball
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 一志愿郑大085600，310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭