应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 纯化蛋白混一起分析两个蛋白形成的二聚体活性，可行吗
111/2返回列表12下一页
查看: 1530  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sunlifang

木虫 (正式写手)

[求助] 纯化蛋白混一起分析两个蛋白形成的二聚体活性，可行吗 已有1人参与

如题，我想想看下两个蛋白之间会不会以二聚体的形式表现活性，可以直接将纯化后的蛋白混一起后分析活性吗？若这样可以混合比例有要求吗？如若能提供相关文献更好，谢谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累 蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-07 12:28:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-07 15:24:23
sunlifang: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-07 15:49:09
尽量以1:1的比例混合，盐浓度要低一些，50-150 mM NaCl, 然后过分子筛，如果形成混合物，那么就和单体分开了，然后再做下面的实验。
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-07-07 15:11:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)
内容已删除
回复此楼
3楼2014-07-07 15:51:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-07-07 15:11:51
尽量以1:1的比例混合，盐浓度要低一些，50-150 mM NaCl, 然后过分子筛，如果形成混合物，那么就和单体分开了，然后再做下面的实验。

我做的构建带的HIS标签，蛋白纯化最后用的是加500mM的PBS buffer洗脱的，你的意思是混合时加入50-150 mM NaCl溶液还是？盐溶液怎么用？谢谢
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-07 16:05:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
两个蛋白都可以透析至盐浓度等价于100mM, 然后按摩尔比1:1混合，浓缩后过分子筛，如果形成复合物，则复合物先洗出，然后是单体。
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
5楼2014-07-07 16:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pennchem at 2014-07-07 16:26:04
两个蛋白都可以透析至盐浓度等价于100mM, 然后按摩尔比1:1混合，浓缩后过分子筛，如果形成复合物，则复合物先洗出，然后是单体。

纯化完再透析？透析的时间是不是也挺长的，我怕我的蛋白活性会受影响，若我直接按1：1混合然后接着作反应可以吗？
赞一下 回复此楼
6楼2014-07-07 16:41:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
那你怎么知道形成了复合物？
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
7楼2014-07-07 18:04:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by pennchem at 2014-07-07 18:04:45
那你怎么知道形成了复合物？

我这两个蛋白没表现出预期的活性（蛋白本身有活性），就是想看看二聚体会不会有预期的活性，如果没有就没有必要再看是否形成复合物了。。。谢谢你哈
赞一下 回复此楼
8楼2014-07-07 18:25:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by pennchem at 2014-07-07 18:04:45
那你怎么知道形成了复合物？

你好我再问下，二者混合后还需要放置一段时间吗？冰上？
赞一下 回复此楼
9楼2014-07-07 19:13:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by sunlifang at 2014-07-07 19:13:15
你好我再问下，二者混合后还需要放置一段时间吗？冰上？...

冰上应该是OK的，低温操作永远是对的
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

sunlifang
行至水穷处，坐看云起时
10楼2014-07-07 20:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunlifang 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +3 布布和一二 2026-08-08 3/150 2026-08-08 18:15 by Lightingo
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 15:59 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 15:07 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WQyTGMbfH7Cx 2026-08-07 4/200 2026-08-08 15:02 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭