应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 纯化蛋白混一起分析两个蛋白形成的二聚体活性，可行吗
52/1返回列表
查看: 1573  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)

[求助] 纯化蛋白混一起分析两个蛋白形成的二聚体活性，可行吗 已有1人参与

如题，我想想看下两个蛋白之间会不会以二聚体的形式表现活性，可以直接将纯化后的蛋白混一起后分析活性吗？若这样可以混合比例有要求吗？如若能提供相关文献更好，谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-07-07 12:28:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by pennchem at 2014-07-07 20:11:56
冰上应该是OK的，低温操作永远是对的...

恩，好滴，非常感谢你的帮助！
赞一下 回复此楼
11楼2014-07-07 20:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-07 15:24:23
sunlifang: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-07 15:49:09
尽量以1:1的比例混合，盐浓度要低一些，50-150 mM NaCl, 然后过分子筛，如果形成混合物，那么就和单体分开了，然后再做下面的实验。
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-07-07 15:11:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlifang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-07-07 15:11:51
尽量以1:1的比例混合，盐浓度要低一些，50-150 mM NaCl, 然后过分子筛，如果形成混合物，那么就和单体分开了，然后再做下面的实验。

我做的构建带的HIS标签，蛋白纯化最后用的是加500mM的PBS buffer洗脱的，你的意思是混合时加入50-150 mM NaCl溶液还是？盐溶液怎么用？谢谢
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-07 16:05:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
两个蛋白都可以透析至盐浓度等价于100mM, 然后按摩尔比1:1混合，浓缩后过分子筛，如果形成复合物，则复合物先洗出，然后是单体。
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
5楼2014-07-07 16:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭