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木木夕星

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 2770330
注册: 2013-11-01
专业: 环境微生物学

[求助] pcr-dgge分析土壤微生物多样性已有4人参与

pcr-dgge分析土壤微生物多样性，巢式扩增16srdna V3区，一直有非特异性扩增，且目的条带亮度很弱，现在想对第一次pcr产物进行纯化，然后再扩增V3区，这样会影响dgge结果吗？请各位高手指点，给出宝贵意见，谢谢啦

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1楼2014-06-26 10:26:44

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ltfe567

木虫 (正式写手)

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虫号: 1427506
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专业: 中药学其他科学问题

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-07-01 23:01:00
木木夕星: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢您的指点 2014-07-09 11:00:50

我认为还是优化下PCR 条件，条带弱的话DGGE结果会很不好的，可以先做梯度PCR，摸索退火温度，在做个降落PCR排除非特异条带，

赞一下(2人)

2楼2014-06-26 10:40:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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