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z8411909

新虫 (小有名气)

[求助] 做原代时细胞数量取少了会不会影响细胞正常增殖 已有1人参与

求助:做原代时细胞数量取少了会不会影响细胞正常增殖?   因为做原代培养时,细胞增殖的数量很少,而我当时也没计数就造成细胞数量较低。我就想问下大家是什么原因造成的呢?
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sc15828888

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-21 19:30:23
培养细胞生长过程:潜伏期→指数增生期→停滞期
在体外培养细胞中,细胞接种数对细胞的生长有影响,适宜的接种密度,可以促使细胞增殖,接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖。如果培养液与细胞的容积比例大于 ...

大神。。。我做的原代培养,冻存复苏后,细胞老是长不好,复苏率50%左右,活下来的细胞,在胞浆可以看到大量的细小空泡,聚集在细胞核周围,然后养着养着陆陆续续开始凋亡,怎么回事呢??
细胞冻存复苏需要注意些什么?
4楼2014-06-22 10:19:31
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
z8411909: 金币+5 2014-06-21 23:33:01
培养细胞生长过程:潜伏期→指数增生期→停滞期
在体外培养细胞中,细胞接种数对细胞的生长有影响,适宜的接种密度,可以促使细胞增殖,接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖。如果培养液与细胞的容积比例大于2000:1,生长物质弥散到细胞外的比例将是细胞内达到低于最小限度的浓度,此时细胞不能再增殖,培养液中的pH变碱,抑制细胞生长,细胞变圆不能贴壁,甚至引起细胞死亡等。如果接种密度太高,每个细胞周围培养液的容积降至0.007mm3以下,由于弥散率的降低,细胞内生物质的浓度增加,容易使排除物或其他代谢产物达到饱和,能量来源也很快耗尽,因此也会妨碍细胞的增殖。
如何选择适宜的接种浓度要根据细胞的代谢和生长繁殖速度以及工作的需要而确定。一般来说,细胞代谢旺盛、生长速度快的细胞如肿瘤细胞,接种浓度宜偏低;而正常组织细胞生长较慢,代谢不够旺盛,接种浓度可偏高;如果是为了保种或不需急用,接种浓度可偏低些;有时为了便于观察细胞形态结构,接种浓度也可适当降低。
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-21 19:30:23
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z8411909

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-21 19:30:23
培养细胞生长过程:潜伏期→指数增生期→停滞期
在体外培养细胞中,细胞接种数对细胞的生长有影响,适宜的接种密度,可以促使细胞增殖,接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖。如果培养液与细胞的容积比例大于 ...

谢谢你的建议
3楼2014-06-21 23:32:55
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舟之行

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sc15828888 at 2014-06-22 10:19:31
大神。。。我做的原代培养,冻存复苏后,细胞老是长不好,复苏率50%左右,活下来的细胞,在胞浆可以看到大量的细小空泡,聚集在细胞核周围,然后养着养着陆陆续续开始凋亡,怎么回事呢??
细胞冻存复苏需要注意些 ...

速度
仿制药一致性评价,多肽及核酸类药物分析及代谢物分析
5楼2014-08-17 21:29:35
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