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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » cck8测细胞增殖是标准曲线是怎么绘制的？
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thanku0967

金虫 (初入文坛)

[求助] cck8测细胞增殖是标准曲线是怎么绘制的？

cck8测细胞增殖的标准曲线是怎么绘制的？是用已知的不同细胞数测相应的OD值然后绘制标准曲线？如果是这样小弟有个疑问，为何不直接数细胞数来绘制生长曲线？
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1楼2012-03-15 00:01:54
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freshblack

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
thanku0967: 金币+10, ★有帮助 2012-03-20 22:53:02
用cck-8没做过标曲，就直接和control组比的。。。
但是我感觉应该是用计数板计数后用CCK8反应做出标曲来，比如做10的3次方，10的4次方，10的5次方。。。到10的10次方~然后以细胞数为横坐标，相应的OD为纵坐标，可以拟合出一条直线来。这样，你后面实验时测定的OD值就可以直接在直线上找到。
如果用数细胞来绘制生长曲线工作量太大，也不准。不如用标曲的方便。但是用标曲的话，每次实验时都要重新绘制，因为细胞状态啊之类的每次独立实验之间会有不一样。
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thanku0967
勤有功，戏无益，满招损，谦得益
2楼2012-03-20 16:06:31
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thanku0967

金虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by freshblack at 2012-03-20 16:06:31:
用cck-8没做过标曲，就直接和control组比的。。。
但是我感觉应该是用计数板计数后用CCK8反应做出标曲来，比如做10的3次方，10的4次方，10的5次方。。。到10的10次方~然后以细胞数为横坐标，相应的OD为纵坐标，可 ...

您能把标曲说的详细些吗 我不是很明白
10的3次方 10的4次方。。。这方法我也想过 不过我接种在六孔板10的3次方 两星期后技术 应该细胞数目不会变化太大 所以这个方法可能误差会很大 不知道您有没有好的点子 谢谢
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3楼2012-03-20 22:51:29
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freshblack

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
thanku0967: 金币+5, ★有帮助 2012-03-22 23:47:26
你要做药物刺激两个周？这么久？
那我感觉有两个方法：
1，你种板的时候按十倍梯度稀释，不要计数，在做标曲的那天再进行计数。
2，你做标曲的细胞，在你测受试板OD的前一天再种板，第二天计数并作标曲。
第一个方法可能比较准些，毕竟是相同的细胞一次处理。
第二个方法不是同一批次处理的细胞，但是计数上可能准点。

这也是我自己的想法，没有运用到实践中。你要做实验的话可能要多做几次摸摸条件，比如按方法一种板的话，初始细胞的浓度就很重要啦，自己要摸索一下~
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勤有功，戏无益，满招损，谦得益
4楼2012-03-21 19:23:07
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freshblack

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
thanku0967: 金币+5 2012-03-22 23:47:37
方法1再说详细一些，因为我个人感觉这个比较准。
就比如10的3次方你计数好了，然后10倍10倍稀释，最后稀释到10的10次方，或者更稀一些。再或者以后经验比较丰富了，可以直接10倍稀释种稀一点。
然后你在测OD前再对它们计个数，再做标曲。

总而言之，方法得靠自己摸索，别人讲的也就是个概念~祝好运啦~~
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勤有功，戏无益，满招损，谦得益
5楼2012-03-21 19:27:53
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thanku0967

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by freshblack at 2012-03-21 19:27:53:
方法1再说详细一些，因为我个人感觉这个比较准。
就比如10的3次方你计数好了，然后10倍10倍稀释，最后稀释到10的10次方，或者更稀一些。再或者以后经验比较丰富了，可以直接10倍稀释种稀一点。
然后你在测OD前再 ...

我不是做药物的
是这样的 比如我把10的3次方个细胞放入培养皿中然后再低氧环境培养两周后看看细胞的增殖情况 用cck8计数 所以要用到标准曲线来测出细胞准确数目 可这个数目应该最多和10的3次方相差1个数量级 所以用您说的十倍稀释来做标准曲线会不会误差比较大啊
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6楼2012-03-22 23:47:02
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nb_cmx

木虫 (小有名气)

著名写手
不懂
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为科学而奋斗
7楼2012-03-23 09:15:13
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freshblack

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by thanku0967 at 2012-03-22 23:47:02:
我不是做药物的
是这样的 比如我把10的3次方个细胞放入培养皿中然后再低氧环境培养两周后看看细胞的增殖情况 用cck8计数 所以要用到标准曲线来测出细胞准确数目 可这个数目应该最多和10的3次方相差1个数量级 所 ...

如果只有一个数量级，那确实可能差的比较大。。。
那你如果数目少的话，其实可以直接数的呀。。。
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thanku0967
勤有功，戏无益，满招损，谦得益
8楼2012-03-24 08:11:02
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thanku0967

金虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by freshblack at 2012-03-24 08:11:02:
如果只有一个数量级，那确实可能差的比较大。。。
那你如果数目少的话，其实可以直接数的呀。。。

实在不行只能如此啦  谢谢
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9楼2012-03-25 13:10:17
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华农夏田

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by freshblack at 2012-03-21 19:23:07
你要做药物刺激两个周？这么久？
那我感觉有两个方法：
1，你种板的时候按十倍梯度稀释，不要计数，在做标曲的那天再进行计数。
2，你做标曲的细胞，在你测受试板OD的前一天再种板，第二天计数并作标曲。
第一个 ...

求助：我打算做个双氧水诱导心肌细胞的毒性试验，想摸索双氧水的最佳诱导浓度，但诱导时间也是个问题额，想设6个浓度梯度，再掐住时间，确定诱导凋亡的最佳浓度。看了帖子，想必CCK8测细胞活力还要考虑细胞接种密度（12H贴壁）等等，我这个方法可行么？望指点啊！
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要科研也要生活
10楼2013-08-28 10:37:08
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