24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1343  |  回复: 4

jianghyou

新虫 (初入文坛)

[求助] 我的罗非鱼肝细胞原代培养图正常吗? 求助1 已有1人参与

小弟最近在养罗非鱼的肝细胞,是个新手,一直养不好,也不知道是哪里出问题了,以下几张图片第一张是刚消化离心后的细胞悬液貌似有部分杂质,第二张图是2天后的,大家觉得那图正常吗?那很多的小亮点是什么啊?不知道是新长的细胞还是污染或者是气泡?这些小亮点在同样的空白培养基里没有,而且我用的几种不同培养基试了,细胞长的越好,小亮点越多,到底是什么啊?我的细胞培养两天后看的还可以,图2,图3,但是到第三天就基本全死了,是什么回事啊?是不是没换培养液,我本计划三天换的,悲剧啊?哪位好心人帮我看看,不甚感激!

培养过程:
罗非鱼酒精喷洒消毒2min,取肝脏后不含钙镁Hanks液(CMC)漂洗,尽量去除血液及结缔组织,手术剪将肝脏剪成1-2mm3小块,0.25%胰蛋白酶—EDTA消化1h左右(冷消化4℃过夜消化),过100um细胞筛2次,70um细胞筛2次过滤,10℃,70g,50g,30g离心,每次3min,测细胞活力,28℃,5%CO2培养。

培养基:L-15+5mM NaHCO3+100UI青链双抗+25ug/ml 氨苄青霉素+15mM HEPES+50ng/ml EGF,以前用过加血清的,效果也不好,也有不少文献没有加血清。

L-15培养基,消化离心后显微镜图片,200X



培养2天后,100X显微镜图片,小亮点是什么?



培养2天后,200X显微镜图片
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shijunyu0618

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
状态不是很好,不是很正常!
2楼2012-03-27 22:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芥末香

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小亮点是非实质细胞,你应该用低速多次离心,就能很好的去除非实质细胞
吃得苦中苦,也不一定能开上路虎.
3楼2012-06-05 14:36:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花和尚鲁豫

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

师兄,我现在也在养罗非鱼原代肝细胞,也有很多问题求指教,求方法
4楼2013-03-04 11:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinchao2099

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不正常。图中绝大多数细胞小,并呈椭圆形,应为血红细胞;只有少量细胞大而圆,并且内含大量脂肪滴,应为肝实质细胞,即hepatocytes。
5楼2014-08-27 11:29:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jianghyou 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +8 草木不言 2026-04-04 9/450 2026-04-10 23:29 by dc19971224
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +17 瓶子PZ 2026-04-09 18/900 2026-04-10 22:47 by 来看流星雨10
[考研] 材料专业344求调剂 +16 hualkop 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 17:28 by laoshidan
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +19 努力奋斗112 2026-04-04 20/1000 2026-04-10 12:15 by pengliang8036
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 材料调剂 +10 18815505510 2026-04-09 11/550 2026-04-09 17:07 by 544594351
[考研] 280求调剂 +7 wzzz王 2026-04-09 7/350 2026-04-09 15:32 by 释放天性
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 0703调剂,一志愿天津大学319分 +23 haaaabcd 2026-04-05 26/1300 2026-04-08 16:19 by luoyongfeng
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 319求调剂 +3 handrui 2026-04-05 3/150 2026-04-06 09:33 by jp9609
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:23 by hemengdong
[考研] 277求调剂 +5 考研调剂lxh 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:03 by chy09050039
[考研] 求调剂到0856材料工程 +3 程9915 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:15 by 蓝云思雨
[考研] 341求调剂 +3 学无止境,冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
信息提示
请填处理意见