24小时热门版块排行榜    

查看: 1302  |  回复: 4

jianghyou

新虫 (初入文坛)

[求助] 我的罗非鱼肝细胞原代培养图正常吗? 求助1 已有1人参与

小弟最近在养罗非鱼的肝细胞,是个新手,一直养不好,也不知道是哪里出问题了,以下几张图片第一张是刚消化离心后的细胞悬液貌似有部分杂质,第二张图是2天后的,大家觉得那图正常吗?那很多的小亮点是什么啊?不知道是新长的细胞还是污染或者是气泡?这些小亮点在同样的空白培养基里没有,而且我用的几种不同培养基试了,细胞长的越好,小亮点越多,到底是什么啊?我的细胞培养两天后看的还可以,图2,图3,但是到第三天就基本全死了,是什么回事啊?是不是没换培养液,我本计划三天换的,悲剧啊?哪位好心人帮我看看,不甚感激!

培养过程:
罗非鱼酒精喷洒消毒2min,取肝脏后不含钙镁Hanks液(CMC)漂洗,尽量去除血液及结缔组织,手术剪将肝脏剪成1-2mm3小块,0.25%胰蛋白酶—EDTA消化1h左右(冷消化4℃过夜消化),过100um细胞筛2次,70um细胞筛2次过滤,10℃,70g,50g,30g离心,每次3min,测细胞活力,28℃,5%CO2培养。

培养基:L-15+5mM NaHCO3+100UI青链双抗+25ug/ml 氨苄青霉素+15mM HEPES+50ng/ml EGF,以前用过加血清的,效果也不好,也有不少文献没有加血清。

L-15培养基,消化离心后显微镜图片,200X



培养2天后,100X显微镜图片,小亮点是什么?



培养2天后,200X显微镜图片
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shijunyu0618

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
状态不是很好,不是很正常!
2楼2012-03-27 22:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芥末香

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小亮点是非实质细胞,你应该用低速多次离心,就能很好的去除非实质细胞
吃得苦中苦,也不一定能开上路虎.
3楼2012-06-05 14:36:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花和尚鲁豫

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

师兄,我现在也在养罗非鱼原代肝细胞,也有很多问题求指教,求方法
4楼2013-03-04 11:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinchao2099

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不正常。图中绝大多数细胞小,并呈椭圆形,应为血红细胞;只有少量细胞大而圆,并且内含大量脂肪滴,应为肝实质细胞,即hepatocytes。
5楼2014-08-27 11:29:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jianghyou 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +4 南迦720 2026-02-28 4/200 2026-02-28 16:31 by etapple
[考研] 0856材料求调剂 +8 hyf hyf hyf 2026-02-28 9/450 2026-02-28 16:27 by etapple
[考研] 285求调剂 +3 满头大汗的学生 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:22 by 无际的草原
[考研] 312求调剂 +4 吃宵夜1 2026-02-28 5/250 2026-02-28 16:11 by gjm133
[考博] 26申博 +3 想申博! 2026-02-26 3/150 2026-02-28 16:07 by nxgogo
[考研] 材料类求调剂 +3 wana_kiko 2026-02-28 3/150 2026-02-28 15:03 by lature00
[考研] 295求调剂 +4 19171856320 2026-02-28 4/200 2026-02-28 13:39 by ms629
[考研] 290求调剂 +4 材料专硕调剂; 2026-02-28 5/250 2026-02-28 13:32 by houyaoxu
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[考研] 280求调剂 +6 Qq206./ 2026-02-21 6/300 2026-02-28 11:20 by 我!要一战成硕
[考博] 博士推荐 +3 花儿笑? 2026-02-21 4/200 2026-02-27 18:30 by 黑!在干嘛
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 10/500 2026-02-27 13:22 by ichall
[基金申请] 什么是人一生最重要的? +10 瞬息宇宙 2026-02-21 10/500 2026-02-27 08:46 by tfang
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[教师之家] 版面费该交吗 +14 苹果在哪里 2026-02-22 17/850 2026-02-26 11:55 by AGI智创机器人
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见