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我的罗非鱼肝细胞原代培养图正常吗？ 求助1 已有1人参与
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小弟最近在养罗非鱼的肝细胞，是个新手，一直养不好，也不知道是哪里出问题了，以下几张图片第一张是刚消化离心后的细胞悬液貌似有部分杂质，第二张图是2天后的，大家觉得那图正常吗？那很多的小亮点是什么啊？不知道是新长的细胞还是污染或者是气泡？这些小亮点在同样的空白培养基里没有，而且我用的几种不同培养基试了，细胞长的越好，小亮点越多，到底是什么啊？我的细胞培养两天后看的还可以，图2，图3，但是到第三天就基本全死了，是什么回事啊?是不是没换培养液，我本计划三天换的，悲剧啊？哪位好心人帮我看看，不甚感激！ 培养过程： 罗非鱼酒精喷洒消毒2min，取肝脏后不含钙镁Hanks液（CMC）漂洗，尽量去除血液及结缔组织，手术剪将肝脏剪成1-2mm3小块，0.25%胰蛋白酶—EDTA消化1h左右（冷消化4℃过夜消化），过100um细胞筛2次，70um细胞筛2次过滤，10℃，70g，50g，30g离心，每次3min，测细胞活力，28℃，5%CO2培养。 培养基：L-15+5mM NaHCO3+100UI青链双抗+25ug/ml 氨苄青霉素+15mM HEPES+50ng/ml EGF,以前用过加血清的，效果也不好，也有不少文献没有加血清。  L-15培养基，消化离心后显微镜图片，200X  培养2天后，100X显微镜图片，小亮点是什么？  培养2天后，200X显微镜图片 |
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qinchao2099
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