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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 蛋白实验：扩大培养菌液时OD值在下降！是何原因？求帮助。
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白实验：扩大培养菌液时OD值在下降！是何原因？求帮助。 已有2人参与

第一次扩大培养时，OD值就下降，别人说噬菌体污染了，于是提质粒重新转化，挑单克隆。
第二次用新的菌液扩大培养时没有问题。
今天第三次还是用新的菌液扩大培养，OD值从0.6降到了0.5.
请帮我分析下是什么原因啊，着急。
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1楼 2014-06-13 16:59:50
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baoqie121314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
鬼羽帝魂: 金币+5, ★有帮助 2014-06-17 09:01:48
你所谓的扩大培养是什么意思，说仔细些，是传代后OD值小啊，还是放置时间长的两次测量啊
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2楼2014-06-16 10:19:54
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by baoqie121314 at 2014-06-16 10:19:54
你所谓的扩大培养是什么意思，说仔细些，是传代后OD值小啊，还是放置时间长的两次测量啊

是把5ML菌液加到500ML培养基里培养，等过段时间OD值为0.5，本想再等一段时间到0.6加IPTG诱导表达的，但是OD值降低到了0.4.而且从0.5到0.4的时间很短，约0.5h-1h之间。
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3楼2014-06-16 17:19:31
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baoqie121314

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-16 17:19:31
是把5ML菌液加到500ML培养基里培养，等过段时间OD值为0.5，本想再等一段时间到0.6加IPTG诱导表达的，但是OD值降低到了0.4.而且从0.5到0.4的时间很短，约0.5h-1h之间。...

你是不是换新的培养基（培养基盐浓度高），首先菌液到培养基中，先要适应一段时间，适应时，菌体有部分死亡，导致菌浓度下降，过一段时间菌适应后会大量繁殖的
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4楼2014-06-17 07:53:21
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by baoqie121314 at 2014-06-17 07:53:21
你是不是换新的培养基（培养基盐浓度高），首先菌液到培养基中，先要适应一段时间，适应时，菌体有部分死亡，导致菌浓度下降，过一段时间菌适应后会大量繁殖的...

培养基一直都是一样的，是师兄以前做的。师兄以前用这个培养基表达的挺好。  “  过一段时间菌适应后会大量繁殖的”   它的OD值一直没有增大，越来越小。
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5楼2014-06-17 09:01:33
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baoqie121314

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-17 09:01:33
培养基一直都是一样的，是师兄以前做的。师兄以前用这个培养基表达的挺好。  “  过一段时间菌适应后会大量繁殖的”   它的OD值一直没有增大，越来越小。...

如果没染菌，一定是你的培养基出现问题了，看看培养基什么和以前不一样的，如果是你师兄以前的培养基，可能时间长了，你重新配置一份吧，有可能是以前的培养基张其他菌，导致培养基出现其他物质或pH值变化了，导致你的菌无法正常生长
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6楼2014-06-18 08:49:18
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by baoqie121314 at 2014-06-18 08:49:18
如果没染菌，一定是你的培养基出现问题了，看看培养基什么和以前不一样的，如果是你师兄以前的培养基，可能时间长了，你重新配置一份吧，有可能是以前的培养基张其他菌，导致培养基出现其他物质或pH值变化了，导致 ...

恩   谢谢
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7楼2014-06-18 15:03:06
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爨乡主人

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
鬼羽帝魂: 金币+2, ★有帮助 2014-07-01 10:54:05
扩大培养之后相对通气肯定没体系小的时候好，氧气不足肯定长的也没小体系的好了。
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8楼2014-06-20 19:06:48
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nieqiantina

银虫 (初入文坛)
为何要分几次扩大培养，好处在哪
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9楼2015-06-25 10:06:26
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nieqiantina

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 爨乡主人 at 2014-06-20 19:06:48
扩大培养之后相对通气肯定没体系小的时候好，氧气不足肯定长的也没小体系的好了。

小体系为什么通气，氧气要好一些
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10楼2015-06-25 10:07:11
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