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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 挑单菌落培养，第一次测OD值后，OD值下降
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ziqianisme

新虫 (初入文坛)

[求助] 挑单菌落培养，第一次测OD值后，OD值下降

挑单菌落摇床180，大概24小时左右，OD值才到1，但是不知道为什么，有时候同样的操作，6个小时后第一次测OD值，几个试管都差不多，大概0.2的样子，13个小时候左右0.7-0.8，一般来说这之后应该长得很快了，可是我隔一个小时再测，0.6.。。。OD值居然下降了。。。再过N个小时，OD值甚至会下降到0.1.。。。。

求助，木有养过细菌，为神马会这样呢。。。从同一个板子里挑的单菌落额。。。
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1楼 2012-07-25 13:20:10
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-25 14:18:34
你挑单菌落培养，是接的几毫升的培养基，加了多少抗生素？如果只是小剂量的话，培养基一般为5毫升，抗生素是1:1000加的。你说你的细菌长的慢，会不会是培养基和抗生素加多了？
之后测OD下降，有可能就是细菌已经死掉了，你摇晃一下，看是不是有细胞碎片，有碎片就说明基本已经死了。操作的时候要规范，多在酒精灯上烧烧，避免染菌。
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3楼2012-07-25 13:50:18
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by dshlove at 2014-01-10 09:05:56
我们后来就停了一周没养，之后把实验室大清理了一遍，现在是每天照紫外，实验操作过程尽量无菌，抗生素和诱导剂什么的都过滤处理，现在已经没死过了。...

十分感谢你的帮助~真的是太头疼了啊~实验总是在一些微不足道的小事上面出问题 太恶心了~
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金戈铁马你要等我
9楼2014-01-10 10:11:34
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普通回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很像是噬菌体感染啊，OD降得这么快，基本是死了。
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2楼2012-07-25 13:29:10
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ziqianisme

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gelois at 2012-07-25 13:50:18
你挑单菌落培养，是接的几毫升的培养基，加了多少抗生素？如果只是小剂量的话，培养基一般为5毫升，抗生素是1:1000加的。你说你的细菌长的慢，会不会是培养基和抗生素加多了？
之后测OD下降，有可能就是细菌已经死 ...

5ml 培养基，抗生素是1:1000加的，24小时OD到1已经算好的了，一半的情况都是48小时才到1，甚是无语。。。如果是从OD2的菌液中按1:100接到培养基的话，大概12-18小时，OD值到1
关于碎片，有时候才摇5.6个小时时，试管里就会有类似碎片样的东西，有的OD值就不会增加，有的随着时间会消失，测OD值一切正常；而那些OD值下降的菌液我也摇过，没有看出什么碎片。。。

还是多注意无论操作。。。O(∩_∩)O谢谢
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4楼2012-07-26 17:52:20
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ziqianisme

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-25 13:29:10
很像是噬菌体感染啊，OD降得这么快，基本是死了。

死了是基本肯定的了。。。就是同样操作的，同批次的试管，有的正常有的死了，费解
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5楼2012-07-26 17:53:15
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by ziqianisme at 2012-07-26 17:53:15
死了是基本肯定的了。。。就是同样操作的，同批次的试管，有的正常有的死了，费解...

跟我们情况一样，肯定是噬菌体感染了，把所有器具仔细杀灭，最近我们就苦逼的在洗瓶子，烘瓶子，照紫外……
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6楼2012-07-26 20:51:08
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李小坦儿

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-26 20:51:08
跟我们情况一样，肯定是噬菌体感染了，把所有器具仔细杀灭，最近我们就苦逼的在洗瓶子，烘瓶子，照紫外……...

麻烦我想问一下 你们噬菌体感染的问题解决了么 是怎么解决的啊 我的菌最近也感染了噬菌体 我用84消毒液把瓶子和试管都过夜处理了 可是还是一个劲的死啊
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金戈铁马你要等我
7楼2014-01-09 19:22:47
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 李小坦儿 at 2014-01-09 19:22:47
麻烦我想问一下 你们噬菌体感染的问题解决了么 是怎么解决的啊 我的菌最近也感染了噬菌体 我用84消毒液把瓶子和试管都过夜处理了 可是还是一个劲的死啊 ...

我们后来就停了一周没养，之后把实验室大清理了一遍，现在是每天照紫外，实验操作过程尽量无菌，抗生素和诱导剂什么的都过滤处理，现在已经没死过了。
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8楼2014-01-10 09:05:56
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 李小坦儿 at 2014-01-10 10:11:34
十分感谢你的帮助~真的是太头疼了啊~实验总是在一些微不足道的小事上面出问题 太恶心了~...

不客气啊，其实操作规范一点就好了，但是有时候也是看点的，点背喝凉水还塞牙呢，实验不顺就放一段除去放松一下，再回来做，会有意想不到的收获
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10楼2014-01-10 13:40:20
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