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摇菌长不出来
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DH5α保种 第一次，从划板的单菌落过夜摇菌，4.5ml的LB，一个单菌落。过夜，液体微浑浊，底部有沉淀。（一般正常的摇菌都是比较均匀的菌液，没有沉淀） 第二次，直接从菌液接种摇菌的，20微升加到9ml的LB中，12小时来看，微浑浊，有沉淀。。 这是染菌了 还是接种量的问题，应该是怎么的方式保种好 挑单菌落微量摇菌过夜，再扩大培养过夜保种吗？ |
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kx444555
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（1）直接拿保种的菌液做PCR，看质粒是否还在 （2）如果还在，那么剩下的问题是， a: 有杂菌/噬菌体 （可以用空白Dh5a，不加抗生素过夜，看能否长出，如果和你描述一样，那就是噬菌体） b: 培养基有问题 c: 抗生素有问题 d: 摇床/温度有问题 e: 每一步楼虫自己考虑吧，能做对照的做对照，逐步解决，good luck 就算是一个单克隆，扔到1L的LB里面，一夜足够长到对数值。 |
6楼2012-11-21 13:01:44
7楼2018-02-06 09:58:35