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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » OD值和菌落数的对应关系
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鸭丫头519

金虫 (小有名气)

[交流] OD值和菌落数的对应关系 已有2人参与

之前我们实验室做的OD值与大肠杆菌菌落数的对应关系比较稳定，最近几次不知道怎么回事，相差很多，有时竟然达到100倍，大家有没有出现过类似的情况呢。知不知道为什么？
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宁静致远
1楼 2011-11-21 15:05:34
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jiaxu111

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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zhang8826857(金币+5): 金币好少的虫子，鼓励 2011-11-22 09:11:45
注意紫外分光光度计或酶标仪的OD值的检测范围，有效区间都很小
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鸭丫头519
2楼2011-11-22 09:04:43
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maidmocha

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
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rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 17:22:23
是否出现了菌体聚集成团的问题。如果E.coli是均匀的话，OD测定不会有太大问题。但只要有菌体聚团，吸光度立马骤升。
另说一句，OD与菌体生长量的对应关系并不很准确，吸光度的测定受诸多问题的影响。为确保实验准确，最好再行测定biomass
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鸭丫头519
3楼2011-11-22 13:47:02
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鸭丫头519

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaxu111 at 2011-11-22 09:04:43:
注意紫外分光光度计或酶标仪的OD值的检测范围，有效区间都很小

你好，请问在什么情况下出现菌体成团的情况呢？是不是我向离心后产生菌体沉淀中加去离子水时候没有涡旋完全么？可是我得涡旋时间和之前一样呀。。。。
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宁静致远
4楼2011-11-23 13:25:53
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鸭丫头519

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by maidmocha at 2011-11-22 13:47:02:
是否出现了菌体聚集成团的问题。如果E.coli是均匀的话，OD测定不会有太大问题。但只要有菌体聚团，吸光度立马骤升。
另说一句，OD与菌体生长量的对应关系并不很准确，吸光度的测定受诸多问题的影响。为确保实验准 ...

你好，请问在什么情况下出现菌体成团的情况呢？是不是我向离心后产生菌体沉淀中加去离子水时候没有涡旋完全么？可是我得涡旋时间和之前一样呀。。。。
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宁静致远
5楼2011-11-23 13:29:21
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maidmocha

铁杆木虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
5楼: Originally posted by 鸭丫头519 at 2011-11-23 13:29:21:
你好，请问在什么情况下出现菌体成团的情况呢？是不是我向离心后产生菌体沉淀中加去离子水时候没有涡旋完全么？可是我得涡旋时间和之前一样呀。。。。

可能是这样。不过要是像E.coli这些的，普通涡旋应该是没问题的。
我有个师姐做的放线菌，液培1天，菌体都结成1mm的球了，还测吸光度呢。这样肯定不行。
其实。要知道，生物学实验必须要数据量大，因为生物在表达与生长上的变异很多（仅仅是表达不同，而不是基因变异），才能得到有效准确的数据。
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6楼2011-11-25 13:20:25
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