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ssfengtian

木虫 (正式写手)


[交流] 关于纸片法,菌悬液浓度

如题,纸片法测抑菌性实验中,文献上说菌悬液要达到0.5麦氏浊度,这是一个标准。想请教各位,在没有浊度仪,紫外可见分光光度计正在修的情况下,怎么测量菌液达到0.5麦氏浊度标准?请说的详细一点,拜谢。
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bobovichy

木虫 (正式写手)


★ ★
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流! 2013-09-06 22:07:42
不解,当时做抑菌实验的时候没有那么严格,直接挑取菌落按一定倍数稀释,涂布后贴纸片进行实验了。
2楼2013-09-06 11:27:54
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skpom

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★ ★
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laozuzunzhe: 金币+4, 鼓励热心交流! 2013-09-06 22:07:13
麦氏浊度标准
(1) 将0.5mL 0.048mol/L的BaCL2 (1.175%w/v BaCL2·2H2O)加到99.5mL 0.18mol/L (0.36N)的H2SO4(1%v/v)中并不断搅动以维持混悬状态。
(2) 按每管4-6mL将硫酸钡悬液分装于带悬盖的管子中,管子尺寸应与培养或稀释接种菌所用的管子一致。
(3) 这些管子应密封并贮存于室温避光处。
(4) 每次使用前,应将浊度标准管置于旋转混匀器上剧烈振动,目测其外观浊度应均匀一致。若有大颗粒出现,此标准管应更换。
(5) 使用前核实其正确浓度,每个月都应证实或更换。浊度标准的正确浓度应使用分光光度计测定吸光度核实。该分光光度计光径为1cm,并配有合适的比色杯。0.5号麦氏标准管在625nm处的吸光度值应为0.08-0.10。
3楼2013-09-06 11:29:19
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ssfengtian

木虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by bobovichy at 2013-09-06 11:27:54
不解,当时做抑菌实验的时候没有那么严格,直接挑取菌落按一定倍数稀释,涂布后贴纸片进行实验了。

那是选择哪个倍数涂布的呢?还是所有倍数都涂?
4楼2013-09-09 08:18:55
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ssfengtian

木虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by skpom at 2013-09-06 11:29:19
麦氏浊度标准
(1) 将0.5mL 0.048mol/L的BaCL2 (1.175%w/v BaCL2·2H2O)加到99.5mL 0.18mol/L (0.36N)的H2SO4(1%v/v)中并不断搅动以维持混悬状态。
(2) 按每管4-6mL将硫酸钡悬液分装于带悬盖的管子中,管子尺 ...

这个地球人都知道,你没有理解我的问题
5楼2013-09-09 08:21:17
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mizhoulong

木虫 (著名写手)


★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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ssfengtian: 金币+10 2013-09-10 08:14:55
去梅里埃公司买比浊管,国产也有,玻璃封好的,很便宜,可以一直用下去

目测比对。

还有一个招,培养18-24的大肠杆菌,10E9 CFU/mL差不多是一个麦氏浓度,其他细菌会有出入,

其实这个浓度不是绝对的,上下波动些,不会影响很大
6楼2013-09-09 08:50:26
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bobovichy

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by ssfengtian at 2013-09-09 08:18:55
那是选择哪个倍数涂布的呢?还是所有倍数都涂?...

问得好,这个记不得了,查一查微生物实验,肯定都有详细过程。
7楼2013-09-09 08:51:51
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ssfengtian

木虫 (正式写手)


引用回帖:
6楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-09-09 08:50:26
去梅里埃公司买比浊管,国产也有,玻璃封好的,很便宜,可以一直用下去

目测比对。

还有一个招,培养18-24的大肠杆菌,10E9 CFU/mL差不多是一个麦氏浓度,其他细菌会有出入,

其实这个浓度不是绝对的,上下 ...

目测比对啊,果然就是用肉眼看啊,误差会不会很大啊,我看文献上说浓度影响有一定关系的,会出现假耐药和假抑制。。有没有其他方法呢?
8楼2013-09-10 08:14:46
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mizhoulong

木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
其他的方法就是用一个简单的浊度仪了,买个单独的浊度仪,应该很便宜吧。

梅里埃的Vitek系统自带浊度仪,很简单的,相信国产会有替代品,估计千把元钱或者几百块就能搞定
9楼2013-09-10 10:36:10
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ssfengtian

木虫 (正式写手)


引用回帖:
9楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-09-10 10:36:10
其他的方法就是用一个简单的浊度仪了,买个单独的浊度仪,应该很便宜吧。

梅里埃的Vitek系统自带浊度仪,很简单的,相信国产会有替代品,估计千把元钱或者几百块就能搞定

嗯,谢谢
10楼2013-09-10 17:40:09
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