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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 液体培养黑曲霉如何确定孢子浓度啊？菌丝结成球了
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huatingzhi

新虫 (初入文坛)

[求助] 液体培养黑曲霉如何确定孢子浓度啊？菌丝结成球了

求助：1.请问固态发酵时菌种接种量10%是按固态发酵基质的干重算 还是按调整料水比后的总重算，这两个接种量相差很大呢？2.液体培养黑曲霉如何确定孢子浓度啊？菌丝结成球了
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1楼 2011-09-06 02:45:19
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ft88524

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

孢子浓度低就不会结成球了么，求解，貌似时间一长一样会扭结
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2楼2011-09-06 08:36:07
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)
★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流，不过以后回帖帮助别人尽量详细点哦^_^ 2011-10-15 19:48:16
霉菌液体培养形成菌丝球是个十分正常的现象！
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3楼2011-09-06 12:07:08
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superzrd

金虫 (小有名气)
★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-27 10:38:46
10%一般指的是占基质干重的比例；孢子计数可以采用血球计数板计数，不过多数情况下要稀释一定倍数。
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化身胡杨！
4楼2011-09-06 15:06:33
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duyiwen999

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-27 10:38:51
液体培养基，摇瓶里加4粒玻璃珠试试
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hardwork,
5楼2011-09-08 11:08:57
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peach9

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander(金币+3, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-09-27 10:38:58
将成熟的孢子收集，一般生理盐水或20%甘油加吐温80溶液，使用血球计数板计数后，注意计算前需要稀释，否则太多无法计数，稀释倍数根据孢子成熟度判断。
计数时会遇到孢子大小不一，是否游动的干扰，自己制定自己的计数习惯即可。
接液体种子培养基，最好按照一个孢子量来接，这样比较接种量才有意义。
参考0.5亿/L的加量试试，这个量可能比较小。
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6楼2011-09-08 18:09:28
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xhg207

金虫 (正式写手)
★
zhang8826857(金币+1): good，鼓励一下，看看lz的反馈 2011-10-15 19:48:47
孢子接种，一般先制孢子悬液（固体培养，将孢子无菌水或生理盐水洗下，3-4层纱布过滤去掉菌丝，需无菌操作），血球计数板计数获得孢子悬液的浓度。接种时，按照接种量和培养液的体积可以计数培养液中的孢子浓度。
丝状真菌的培养，在摇床上如果是旋转的一般形成菌丝球，如果是往返式的即左右摇的会出现不规则形状。如果采用浅层培养会出现菌膜。
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7楼2011-09-08 20:36:15
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51jiankang

铜虫 (小有名气)
收集孢子可以通过普通滤纸过滤获得吗
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8楼2011-09-26 19:40:18
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魔女牛牛1012

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1、接种应该是按照干重比来计算，如果按照湿重比的话在你控制物料水分的同时就会无形中来影响你对培养基的接种量，在记载数据上就会产生严重的偏差。如果是液体的话就要看你接种的菌种自身的纯度了
2、黑曲霉生长过程中形成菌丝这是很正常的现象，可以从这几方面来减少菌丝结团：
①在摇床转速上100-120R/min
②控制溶氧
③添加玻璃珠
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虚心学习天天向上
9楼2011-12-05 15:58:51
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zhqw423

木虫 (著名写手)
引用回帖:
1882258楼: Originally posted by 51jiankang at 2011-09-26 19:40:18
收集孢子可以通过普通滤纸过滤获得吗

收集孢子，可以用双层擦镜纸，或者4层无菌纱布进行，滤纸估计太厚了，纤维孔径过小会把孢子也拦住。
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大其心，容天下之事；虚其心，受天下之物；平其心，论天下之先；潜其心，观天下之理；定其心，应天下之变。
10楼2012-09-25 09:43:33
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