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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌悬液浓度的配置问题
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sonumlhamo

新虫 (小有名气)

[求助] 菌悬液浓度的配置问题

做抗白色念珠菌实验时菌浓度的控制我是用血球计数板，每次差不多都会是10^7级别的菌浓度，最后要的是10^3级别的菌浓度，但是我用平板计数的时候根本就没那么多的菌，这是什么原因。
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1楼2013-05-27 16:51:39
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的10^3的菌在平板上有多少克隆？检查一下平板计数是否计算正确。计数板计算下来是菌数/ml，你按照这个从10^7稀释10000倍后到10^3，取了多少菌液涂板？
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2楼2013-05-28 08:42:21
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sonumlhamo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-28 08:42:21
你的10^3的菌在平板上有多少克隆？检查一下平板计数是否计算正确。计数板计算下来是菌数/ml，你按照这个从10^7稀释10000倍后到10^3，取了多少菌液涂板？

取200ul涂布～但最后只有100左右的小菌落～
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3楼2013-05-28 08:53:18
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sonumlhamo

新虫 (小有名气)
取200ul涂布，但最后只有100左右的小菌落～
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4楼2013-05-28 08:53:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by sonumlhamo at 2013-05-28 08:53:48
取200ul涂布，但最后只有100左右的小菌落～

也就是说涂板测得的菌浓度是500/ml，是计数板测到的一半左右。
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5楼2013-05-29 07:05:16
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老娘爱吃肉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
亲，请注意白色念珠菌的真菌，一般真菌的颗粒比较大，若配制的是10^7级别的菌浓度所对照的是麦氏比浊管的话，所得到的真正白色念珠菌的菌悬液浓度只有10^6而已。一般配制像白色念珠菌类的真菌菌悬液所对照的麦氏比浊管应是本身的浓度除以30才是真菌的浓度。即想配置10^7级别的菌浓度所对照的比浊管应是3x10^8cfu/ml
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6楼2013-05-29 11:15:00
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sonumlhamo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 老娘爱吃肉 at 2013-05-29 11:15:00
亲，请注意白色念珠菌的真菌，一般真菌的颗粒比较大，若配制的是10^7级别的菌浓度所对照的是麦氏比浊管的话，所得到的真正白色念珠菌的菌悬液浓度只有10^6而已。一般配制像白色念珠菌类的真菌菌悬液所对照的麦氏比浊 ...

我没用麦氏比浊管，都是血球计数，难道也是一样？
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7楼2013-05-30 09:26:16
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老娘爱吃肉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by sonumlhamo at 2013-05-30 09:26:16
我没用麦氏比浊管，都是血球计数，难道也是一样？...

不一样。血球计数还是比较准确的
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8楼2013-05-31 08:15:26
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pfeng00

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

血球计数板不能区分死菌还是活菌，如果样品里面死菌占绝大多数，平板计数出来的就很少了。不知道你镜检计数的样品和平板计数的样品有没有什么改变。
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9楼2013-05-31 09:32:07
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sonumlhamo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by pfeng00 at 2013-05-31 09:32:07
血球计数板不能区分死菌还是活菌，如果样品里面死菌占绝大多数，平板计数出来的就很少了。不知道你镜检计数的样品和平板计数的样品有没有什么改变。

平板计数的样品就是稀释大概10^4后的样品，浓度大概在10^3数量级，有时平板上甚至不长菌。不知道除了可能没混匀外还有没有其他原因。
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10楼2013-05-31 09:38:31
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