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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于纸片法，菌悬液浓度
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ssfengtian

木虫 (正式写手)

[交流] 关于纸片法，菌悬液浓度

如题，纸片法测抑菌性实验中，文献上说菌悬液要达到0.5麦氏浊度，这是一个标准。想请教各位，在没有浊度仪，紫外可见分光光度计正在修的情况下，怎么测量菌液达到0.5麦氏浊度标准？请说的详细一点，拜谢。
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1楼 2013-09-06 10:45:38
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bobovichy

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-09-06 22:07:42
不解，当时做抑菌实验的时候没有那么严格，直接挑取菌落按一定倍数稀释，涂布后贴纸片进行实验了。
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2楼2013-09-06 11:27:54
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skpom

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+4, 鼓励热心交流！ 2013-09-06 22:07:13
麦氏浊度标准
（1） 将0.5mL 0.048mol/L的BaCL2 (1.175%w/v BaCL2·2H2O)加到99.5mL 0.18mol/L （0.36N）的H2SO4(1%v/v)中并不断搅动以维持混悬状态。
（2） 按每管4-6mL将硫酸钡悬液分装于带悬盖的管子中，管子尺寸应与培养或稀释接种菌所用的管子一致。
（3） 这些管子应密封并贮存于室温避光处。
（4） 每次使用前，应将浊度标准管置于旋转混匀器上剧烈振动，目测其外观浊度应均匀一致。若有大颗粒出现，此标准管应更换。
（5） 使用前核实其正确浓度，每个月都应证实或更换。浊度标准的正确浓度应使用分光光度计测定吸光度核实。该分光光度计光径为1cm，并配有合适的比色杯。0.5号麦氏标准管在625nm处的吸光度值应为0.08-0.10。
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3楼2013-09-06 11:29:19
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ssfengtian

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bobovichy at 2013-09-06 11:27:54
不解，当时做抑菌实验的时候没有那么严格，直接挑取菌落按一定倍数稀释，涂布后贴纸片进行实验了。

那是选择哪个倍数涂布的呢？还是所有倍数都涂？
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4楼2013-09-09 08:18:55
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ssfengtian

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by skpom at 2013-09-06 11:29:19
麦氏浊度标准
（1） 将0.5mL 0.048mol/L的BaCL2 (1.175%w/v BaCL2·2H2O)加到99.5mL 0.18mol/L （0.36N）的H2SO4(1%v/v)中并不断搅动以维持混悬状态。
（2） 按每管4-6mL将硫酸钡悬液分装于带悬盖的管子中，管子尺 ...

这个地球人都知道，你没有理解我的问题
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5楼2013-09-09 08:21:17
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mizhoulong

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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ssfengtian: 金币+10 2013-09-10 08:14:55
去梅里埃公司买比浊管，国产也有，玻璃封好的，很便宜，可以一直用下去

目测比对。

还有一个招，培养18-24的大肠杆菌，10E9 CFU/mL差不多是一个麦氏浓度，其他细菌会有出入，

其实这个浓度不是绝对的，上下波动些，不会影响很大
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6楼2013-09-09 08:50:26
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bobovichy

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by ssfengtian at 2013-09-09 08:18:55
那是选择哪个倍数涂布的呢？还是所有倍数都涂？...

问得好，这个记不得了，查一查微生物实验，肯定都有详细过程。
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7楼2013-09-09 08:51:51
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ssfengtian

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-09-09 08:50:26
去梅里埃公司买比浊管，国产也有，玻璃封好的，很便宜，可以一直用下去

目测比对。

还有一个招，培养18-24的大肠杆菌，10E9 CFU/mL差不多是一个麦氏浓度，其他细菌会有出入，

其实这个浓度不是绝对的，上下 ...

目测比对啊，果然就是用肉眼看啊，误差会不会很大啊，我看文献上说浓度影响有一定关系的，会出现假耐药和假抑制。。有没有其他方法呢？
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8楼2013-09-10 08:14:46
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mizhoulong

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
其他的方法就是用一个简单的浊度仪了，买个单独的浊度仪，应该很便宜吧。

梅里埃的Vitek系统自带浊度仪，很简单的，相信国产会有替代品，估计千把元钱或者几百块就能搞定
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9楼2013-09-10 10:36:10
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ssfengtian

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-09-10 10:36:10
其他的方法就是用一个简单的浊度仪了，买个单独的浊度仪，应该很便宜吧。

梅里埃的Vitek系统自带浊度仪，很简单的，相信国产会有替代品，估计千把元钱或者几百块就能搞定

嗯，谢谢
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10楼2013-09-10 17:40:09
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