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[求助]
求助!中药复方液相色谱梯度洗脱条件的优化! 已有1人参与
本人刚下实验室做实验,很多东西都不懂, 最近要做一个复方的图谱,定性实验,要尽量把峰分离开,这是截的图谱:
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色谱图.png
图1
峰1-没食子酸,2-绿原酸,3-芍药苷,4-滨蒿内酯,5-毛蕊异黄酮,6-姜黄素,7-大黄素
色谱条件如下:
高效液相色谱仪:岛津LC-20A;
色谱柱:SHIMADZUShim-pack VP-ODS (250L×4.6mm),柱温箱为30℃,检测波长为254nm,流速是1ml/min;
进样量:20微升;
流动相:A:0.05%冰乙酸,B:甲醇;
梯度洗脱系统:
Time(min) A(%) B(%)
0 90 10
5 90 10
20 80 20
125 10 90
135 5 95
4号峰与6号峰没分开,该怎么调流动相?期待大神们的指点!谢谢了!
目前处于不断尝试调整调整流动相的过程中,这是下午我做的调整流动相后的图谱:(图谱更不好看了T_T)
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图谱2.png
图 2
梯度洗脱系统:
Time(min) A(%) B(%)
0 90 10
5 90 10
35 70 30
65 60 40
115 10 90
125 5 95
图1中4号峰约在30%~40%甲醇时间段里,图1该时间段跑15min,为了分开4号峰,把时间拉长变成跑30min了,结果如图2,保留时间55.546处,还是没有分开。最后意外的分开了6号峰,保留时间102.745处。
有没有做过中药复方的前辈?可以传授一下调整流动相的方法或经验吗?谢谢了! |
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