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影洛1986

新虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱这样梯度洗脱可以吗已有7人参与

请问0.02M磷酸二氢钾和甲醇这样比例和时间梯度洗脱可以吗
时间        0.02M磷酸二氢钾                甲醇
0                   99                                     1
15                0                                            100
15.1             99                                           1
经过0.1分钟从纯甲醇变为0.02M磷酸盐溶液可以吗? 柱子为SB-C8色谱柱
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wolaile35

木虫 (小有名气)

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★ ★ ★
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费姚永芬: 金币+3, 谢谢交流,欢迎常来分析版 2014-05-20 08:40:13
引用回帖:
2楼: Originally posted by e_liang369 at 2014-05-19 12:29:16
完全可以,15min这段已经结束梯度洗脱,后应该是在平衡色谱柱

同时回复2楼。
不建议这么做!
根据自身的经验,甲醇和磷酸二氢钾使用最好不要超过80%,超过75%就有析出结晶的危险。如果需要使用高比例有机相,还是换成乙腈或换成其他柱子。
4楼2014-05-19 14:18:59
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zuoan1yue

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
尽量不要这么做,15min钟结束时甲醇为100%了,磷酸二氢钾再遇甲醇容易析出,建议改变梯度浓度洗脱。
仅供参考
时间        0.02M磷酸二氢钾                甲醇
0                   95                                5
15                  5                                 95
15.1              95                                 5
5楼2014-05-19 14:41:14
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普通回帖

e_liang369

金虫 (正式写手)

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完全可以,15min这段已经结束梯度洗脱,后应该是在平衡色谱柱
悲催的研发!
2楼2014-05-19 12:29:16
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

图谱积分到15min即可
悲催的研发!
3楼2014-05-19 12:29:49
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wy19871124

新虫 (职业作家)

质谱首席顾问

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不建议由无机盐直接变为有机相,对色谱柱有影响盐残存在里面,如果要这么走梯度使用后必须以纯水冲洗半个小时以上
6楼2014-05-19 14:54:48
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

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最好不要用这个梯度 太伤柱子了
7楼2014-05-19 15:35:56
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

100%甲醇的却不行
悲催的研发!
8楼2014-05-19 15:56:57
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

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不可以,后面有机相比例高了的话。磷酸盐会沉淀,你的柱子和泵基本就这样坏了。。。
9楼2014-05-19 17:56:02
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zhb_yjs

铁虫 (小有名气)

这个盐浓度,有机相高比例肯定会析出盐的。你可以用这个比例(有机相高比例)自己手混一下看看有没有问题,再在仪器上走这个比例。
10楼2014-05-20 15:20:21
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