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阳阳的猫猫

金虫 (小有名气)

[交流] WB背景又高了,请教高手

这是今天的显影结果,BSA封闭室温1h,一抗anti-nitrotyrosine度过夜,二抗anti-rabbit室温2h。和显影液在膜上时间长了有关吗?

WB背景又高了,请教高手
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by 阳阳的猫猫 at 2014-06-02 09:13:53
非常感谢。我的显影液在膜上大约半分钟吧,然后才开始曝光。...

你在膜上显影?不是应该用胶片么。。。
6楼2014-06-02 10:54:01
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
youlinglyw: 金币+2 2014-07-18 12:53:52
封闭时间短了,二抗时间长了
2楼2014-05-30 11:12:40
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
youlinglyw: 金币+2 2014-07-18 12:54:15
1. 封闭液用5%脱脂奶粉会比BSA好,封闭1小时一般够了。当然如果奶粉中有影响你目的蛋白检测的成分那你还是用BSA,增加封闭时间;2. 二抗反应时间1小时即可,浓度也不要太大。至于你说的显影时间长,你到底显了多长时间?好的显影液一般1 min内就可以了。
4楼2014-05-31 18:50:59
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阳阳的猫猫

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-05-31 18:50:59
1. 封闭液用5%脱脂奶粉会比BSA好,封闭1小时一般够了。当然如果奶粉中有影响你目的蛋白检测的成分那你还是用BSA,增加封闭时间;2. 二抗反应时间1小时即可,浓度也不要太大。至于你说的显影时间长,你到底显了多长时 ...

非常感谢。我的显影液在膜上大约半分钟吧,然后才开始曝光。
5楼2014-06-02 09:13:53
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