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普通的SDS-PAGE:测定豆粕中蛋白质
本人做普通的SDS-PAGE电泳试验,不做western。只是,大致定性看一下豆粕中蛋白质的分布。
目前样品(豆粕)蛋白质已经有较清晰的条带,但是蛋白质marker 的其中1~2条带,总有弥散,使得整张图不是很完美。开始用的是takara的marker,分子量在14.4-97.4Kda,第三条带(44.3Kda)出现弥散。现在用的thermo的mraker,分子量14.4-116kda,第三条带45kad弥散较重,第4条带35kda略有弥散。
问题:为什么总是这个范围的条带弥散?
只是marker的这1-2条带弥散,其他带都正常?并且相近分子量的样品却没有此类现象,说明电泳条件应该不是出现此现象的原因。
这个现象是什么原因造成的?怎么解决?
两个公司的marker 都严格按照说明书上的要求预处理、存放。各电泳条件也都符合要求,从样品的图谱可以看出,电泳条件之类的问题应该不是造成marker出现此现象的原因(我的观点)。而且,marker在胶体中的位置也更换过,结果还是一样的。这个现象,我当真是找不出是什么原因了。麻烦各位高手,指点迷津!
本人是新虫,金币不多,也不太会用,若是晚些回赠或者其他,请各位高手海涵。
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