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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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qq466344154

金虫 (小有名气)

[求助] 求助鸡肝细胞的分离培养 已有1人参与

先大体说下我的制作方法,鸡肝取出后用5%双抗反复多次清洗后,采用机械剪碎法,0.25%胰酶、0.01%EDTA、37度消化5min,后8层纱布过滤、离心,用含胰岛素的无血清DMEM培养基制成肝细胞悬液,培养。
   过程大体就这样,但是培养24h了,完全没有文献说的肝细胞形态,而且好像还含有许多血细胞。请看下图。前几次用了含5%胎牛血清的DMEM培养,也是没有效果。是不是我的制作方法不对?难道非要用灌流法么?我只需要能做2个培养瓶的细胞量就够了。
  请前辈们帮忙看看吧,在做不出来就不用毕业了,后续还有许多内容要做,这连个细胞都没整好。关键是鸡肝取材太难了,每次都要等材料,一等就是半个多月没了。图片都是在高倍镜下拍的。

求助鸡肝细胞的分离培养
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求助鸡肝细胞的分离培养-1
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求助鸡肝细胞的分离培养-2
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求助鸡肝细胞的分离培养-3
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求助鸡肝细胞的分离培养-4
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千乐

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
亲,建议你还是用灌流法吧。
首先,灌流可以更好更完全地除掉血细胞,要知道肝脏里面血是很多的啊。
其次,灌流消化可以更完全更温和地把细胞分散开来,要是把肝脏整个弄下来再消化,不仅消化不完全,最要紧的是很容易对细胞造成机械损伤。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
欲将心事付瑶琴,知音少,弦断有谁听
2楼2014-05-10 11:22:38
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