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qq466344154金虫 (小有名气)
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[求助]
求助鸡肝细胞的分离培养 已有1人参与
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先大体说下我的制作方法，鸡肝取出后用5%双抗反复多次清洗后，采用机械剪碎法，0.25%胰酶、0.01%EDTA、37度消化5min，后8层纱布过滤、离心，用含胰岛素的无血清DMEM培养基制成肝细胞悬液，培养。 过程大体就这样，但是培养24h了，完全没有文献说的肝细胞形态，而且好像还含有许多血细胞。请看下图。前几次用了含5%胎牛血清的DMEM培养，也是没有效果。是不是我的制作方法不对？难道非要用灌流法么？我只需要能做2个培养瓶的细胞量就够了。 请前辈们帮忙看看吧，在做不出来就不用毕业了，后续还有许多内容要做，这连个细胞都没整好。关键是鸡肝取材太难了，每次都要等材料，一等就是半个多月没了。图片都是在高倍镜下拍的。  WP_20140509_001.jpg  WP_20140509_002.jpg  WP_20140509_003.jpg  WP_20140510_001.jpg  WP_20140510_002.jpg |
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2楼2014-05-10 11:22:38